特别提示:包括ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件)
英文名称:ISRE-luc Reporter gene plasmid
产品货号:YT449
产品规格:1μg
ISRE报告基因质粒是用于检测ISRE转录活性水平的报告基因质粒。ISRE质粒是以pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个ISRE结合位点,可以高灵敏度地检测ISRE的激活水平。
pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
ISRE质粒的主要信息如下:
Base pairs |
5671 |
ISRE response element |
26-85 |
Minimal TA promoter (pTA) |
108-130 |
luc2 reporter gene |
172-1824 |
SV40 late poly(A) signal |
1859-2080 |
SV40 early enhancer/promoter |
2128-2546 |
Synthetic neomycin phosphotransferase |
|
(Neor) coding region |
2571-3365 |
Synthetic poly(A) signal |
3390-3438 |
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region |
3505-3524 |
ColE1-derived plasmid replication origin |
3762 |
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region |
4553-5413 |
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site |
5518-5671 |
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region |
5620-5639 |
ISRE质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. ISRE可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
3. 可以激活ISRE的试剂,可以用作ISRE报告基因检测时的阳性对照。
储存条件:-20℃。
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纯度:
1. OD260nm/280nm>1.8。
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6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
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8. 本产品可以制备20只裂殖酵母感受态细胞(需要100mL裂殖酵母培养液),其中A型只用于制备感受态细胞,B型还带高效转化液。
试剂盒组成:
组分 |
BTN100103A |
BTN100103B |
溶液A |
1ml |
1ml |
高效裂殖酵母转化液 |
- |
一套(20次) |
使用说明书 |
1份 |
1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用效果:
将一个酵母菌落接种到SLD培养基中,30℃摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0,冰浴15分钟后离心弃上清,用自备无菌水洗涤三次,然后用相当于菌液最初体积百分之一的溶液A重悬,按每管50μl分装,放-80℃保存。