分子生物学试剂

劳斯伴随病毒

基本信息
产品名称:
劳斯伴随病毒
英文名称:
Rous Associated Virus RT-qPCR Kit(Probe Method)
国产/进口:
国产
产地/品牌:
百奥莱博
型号:
BTN15-38800
参考报价:
总点击数:
154
更新日期:
2025-05-14
产品类别:

性能参数

特别提示:包括劳斯伴随病毒(RAV)荧光定量RT-PCR试剂盒(探针法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:劳斯伴随病毒(RAV)荧光定量RT-PCR试剂盒(探针法)
英文名称:Rous Associated Virus RT-qPCR Kit(Probe Method)
产品货号:BTN15-38800
产品规格:50次



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名称:新布尼亚病毒单重荧光PCR检测试剂盒
货号:SYA249
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对新布尼亚病毒特异性引物,结合特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对新布尼亚病毒 RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中新布尼亚病毒的探针报告基团为FAM。

二、用途:
本试剂盒适用于新布尼亚病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
新布尼亚荧光qRT-PCR反应液 1管 960μL/管
酶混合物 1管 48μL/管
阴性对照 1管 250μL/管
阳性对照 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。

五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的处理与RNA提取
6.1 样品前处理
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0.2g于研磨器中研磨,加入1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL 灭菌离心管中;液体样品,直接取100μL提取。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液、RT-PCR Reaction Buffer、酶混合物,冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光SFTSV反应液 20µL N×20µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 21µL N×21µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照/阳性对照4μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 42℃ for 20 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
55℃ for 30 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照:均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值<35的样本为阳性,表明新布尼亚病毒核酸阳性。
(2) Ct值显示为无或Ct值≥38的样本为阴性样本,表明新布尼亚病毒核酸阴性。
(3) 如果35≤Ct值<38,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行新布尼亚病毒 qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明新布尼亚病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。

九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

公司简介
北京百奥莱博科技有限公司一家专注于生命科学研究领域的生物技术公司,坚持“质量至上,服务为本,全心全意助力生命科学”的理念,为广大用于提供稳定、可靠、专业的产品和服务支持,产品线包括分子生物学,细胞生物学,免疫检测,抗体,重组蛋白,血液制品等系列。“忙忙碌碌的平凡,铸就事业的不凡”。让我们携起手来,共同创造生命科学的蓬勃发展。

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