试剂成分
纯化的单克隆抗igg4抗体(mAb)与荧光素异硫氰酸酯(FITC)偶联,以≤0.09% (m/v)叠氮化钠、BSA 1% (m/v)磷酸盐缓冲液供应。
克隆:SAG4
同形像统计图:鼠标IgG1
每瓶药量:足够25次试验
预期用途及性能
IgG4- fitc是一种流式细胞术检测IgG4表达细胞的直接免疫荧光试剂。IgG4- fitc识别人IgG4的Fc区域(CH2域)内的一个表位。
IgG是人类血清中含量最高的免疫球蛋白(约占总含量的80%)。可溶性IgG (sIgG)抗体在血管内和血管外池中分布均匀。
因为伽马重链基因不止一个,所以IgG有四个不同的亚型负责对微生物的保护:IgG1(总体占65%)、IgG2(总体占25%)、IgG3(总体占6%)和IgG4(总体占4%)。这些分子具有不同的生物学特性,具有固定补体蛋白和与吞噬细胞受体相互作用的独特能力。IgG1和IgG3亚型是特别好的opsonins和介导抗体依赖细胞介导细胞毒性(ADCC)的介质(1)。
sIgG抗体是补体的重要激活物,但不如sIgM抗体有效。IgG3 是 最 有效 的 complementfixing IgG subclass, 虽然 IgG1 少 efficient, IgG2 更 少 。IgG4无法绑定C1q,因此无法修复经典通路中的补体(1)
只有IgG抗体才能穿过哺乳动物的胎盘,而母体的IgG1、IgG3和IgG4分子被发现对赋予被动免疫至关重要,而被动免疫可以保护发育中的人类胎儿和新生儿在出生后的最初几个月。IgG2穿过胎盘的效率要低得多(1)
CYT-IGG4F应该与BulklysisTM (CYT-BL) buffer一起使用,它允许您对大量细胞进行染色,并分析IgG4+ memory B cells和plasma cells等低频亚群。如果使用另一种裂解方案,则必须使用PBS+1% (m/v) BSA +≤0.09% (m/v)叠氮化钠进行两步预染色洗涤。
本试剂必须经流式细胞仪检测合格方可使用。
储存条件
试剂稳定,直到标签上显示的截止日期,当储存在2 - 8ºc试剂不应该被冻结或暴露在直射光在孵化期间存储或细胞。将试剂瓶放在干燥处。一旦打开,小瓶必须储存在一个垂直的位置,以避免任何可能的溢出。
过程
全血/骨髓样本必须在无菌的试管中进行(3,4),以收集含有适当抗凝血剂的血液(建议使用EDTA)。我们强烈建议每位研究人员根据具体的应用/实验对试剂进行滴定。用合适的抗体混合染色5x106白细胞,用于B细胞亚群鉴定,包括IgG4-FITC,室温孵育30分钟。
在样品制备完成后的第一个小时内,用流式细胞仪以中等流速采集。
文献
1. The Immune Response. Basic and Clinical Principles (2006). Tak W. Mak and Mary E. Saunders. Elsevier Academic Press.
2. Protection of Laboratory Workers from occupationally acquired infections. Second edition; approved guideline (2001). Villanova PA: National Committee for Clinical Laboratory Standards; Document M29-A2.
3. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture- approved standard; Fifth edition (2003). Wayne PA: National Committee for Clinical Laboratory Standards; Document H3-A5.
4. Clinical applications of flow cytometry: Quality assurance and immunophenotyping of lymphocytes; approved guideline (1998). Wayne PA: National Committee for Clinical Laboratory Standards; Document H42-A.
本产品仅保证符合标签上的数量和内容。没有超出产品标签说明之外的任何保证。细胞生长素的唯一责任仅限于更换产品或退还购买价格。
更多的信息请登录www.premedlab.com, 或拨打热线010-51668388-8011,QQ1793915448咨询更多的信息。