产品描述
普瑞麦迪的Prim® hMSC SF-M间充质干细胞培养基由素有中国“干细胞之父”之称的业界顶级科学家领衔，团队成员由国内外先进单位组成，具有强大的技术力量支撑，同时培养基原材料全部来自进口品牌。
经实验室及广大用户测试对比，Prim间充质干细胞培养基质量远优于进口培养基，细胞增速、维持细胞未分化状态等技术指标更胜一筹。公司已与国内众多医院、细胞治疗公司以及科研院所等建立了长期稳定的合作关系。
Prim® hMSC SF-M间充质干细胞培养基是一种无血清、无异源动物成分、化学成分明确的人间充质干细胞培养基，且无需昂贵的铺板蛋白，生长更优于血清培养基。
Prim®适用于人骨髓和脐带间充质干细胞原代和传代培养。产品严格无菌，无病毒和支原体，性能稳定，使用该培养基能使HMSC在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化（至少11代以内）。
产品规格

产品货号	描述	规格	贮藏	运输
10005	基础培养基(HMSCSF-BM)	475ml	2-8℃ 避光保存	冰袋运输
	无动物源生长添加剂(HMSCSF-S)	25ml	-80℃ 保存

产品优势和特点
Ø 同时适用于原代和传代培养人间充质干细胞。
 
          图1.骨髓间充质干细胞在Prim培养24小时和48小时图片
             注：细胞呈梭形，贴壁状态良好，无明显杂质，细胞无老化现象
Ø 化学成份明确的无血清培养基
培养基主要成份为商用的基础培养基、白蛋白、细胞生长因子、胰岛素、转铁蛋白和脂类等；其中的所有蛋白质和多肽分子均通过基因重组技术，在细菌或植物细胞中表达后纯化而得。这种培养体系不含人或动物血清，不存在批间误差和潜在的动物源病原体等传染可能性（附图2和图3）。

图2.* 蛋白印迹杂交显示人血清（human serum）和Prim® hMSC SF-M中人IgG含量
注： 人血清样本蛋白上样量分别为50和25ug；Prim® hMSC SF-M样本蛋白上样量为80ug。蛋白样本经SDS-PAGE分离后，转膜，加入兔抗人IgG抗体和相应二抗反应，化学发光法显示结果。表明在可检测的范围内，Prim® hMSC SF-M中不含人IgG，间接证明SF-M不含人血清。
 

图3. 蛋白印迹杂交显示Prim® hMSC SF-M中人牛血清白蛋白（BSA）含量
注：BSA上样量分别为60ug，30ug和6ug；无血清培养基样本蛋白上样量为80ug。蛋白样本经SDS-PAGE分离后，转膜，加入兔抗BSA抗体和相应二抗反应，化学发光法显示结果。表明在可检测的范围内，Prim® hMSC SF-M中不含BSA，间接证明Prim® hMSC SF-M不含牛血清
Ø Prim® hMSC SF-M使人MSC快速扩增
在商用培养基的基础上，Prim® hMSC SF-M添加了bFGF等多种细胞生长因子，含有细胞培养纯度的人白蛋白、脂类物质、维生素和多种微量元素。使用Prim® hMSC SF-M传代培养人MSC，细胞增殖速度优于传统培养基（含10%经筛选的FBS的低糖DMEM）。
丰富的营养及自发分化抑制剂的使用，保障间充质干细胞快速扩增的同时，维持其表型及多向分化特性。

图4. Prim® hMSC SF-M与传统培养基培养人MSC增殖速度比较
注： 将人骨髓MSC按106/皿接种于150mm培养皿中，5天后胰蛋白酶消化收获细胞，计数。结果显示，在扩增人骨髓MSC能力方面，Prim® hMSC SF-M优于10%经筛选的FBS的低糖DMEM。
 
         图5. Prim® hMSC SF-M与某进口品牌人MSC增殖速度比较
 
Ø Prim® hMSC SF-M保障扩增后人MSC的“干性”,即多向分化潜能
Prim® hMSC SF-M中含有某些小分子物质，可抑制人MSC培养过程中的自发分化，从而在传代过程中，维系人MSC的表面特征和多向分化性。

图6. 无血清培养基培养的人骨髓MSC表面分子标记分析
注： 人骨髓MSC传代2次后，收集细胞，加入PE标记的小鼠抗人相应抗体反应，流式细胞仪收集数据，WinMdi软件分析。结果显示，细胞均一表达CD29，CD44和CD73，不表达CD31）（内皮细胞标记）和CD45（血细胞标记）。
 

图7. 人MSC分化能力鉴定图
注： 取第1代人脐带MSC，分别加入含10%胎牛血清（fetal calf serum，FCS）和SF-M体系，传代培养2次后加入成骨或成脂肪诱导体系培养，碱性磷酸酶（左）或油红O（右）染色。为三次以上实验结果。证实两种体系培养的人MSC，均具有体外成骨和成脂肪能力。
Ø 无需预铺板即适于hMSC原代培养和传代扩增
由基础培养基（475ml）和添加剂（25ml）混合组成的Prim® hMSC SF-M，含有多种活性粘附分子，适于人骨髓、脂肪和脐带MSC的原代和传代培养，无需使用粘附剂将培养瓶（皿）预铺板，方便实用。

 
图8. 将人骨髓单个核细胞悬浮于Prim® hMSC SF-M中培养48小时和72小时
注： 培养48小时（左）和72小时（右）后出现梭形贴壁细胞及其组成的小集落。标示：50µm

图9. Prim® hMSC SF-M进行人骨髓MSC传代培养时的形态观察。
注： 左：细胞接种24小时后形态，呈典型成纤维细胞样。右：细胞培养72小时后形态。放大倍数：100X
Ø Prim® hMSC SF-M保障多次传代人MSC不发生恶性转化
Prim® hMSC SF-M中添加了适量的ROS抑制剂，以减少培养过程中代谢产物对细胞产生损伤的可能性。如附图8所示，为探讨培养中的MSC是否发生转化，以人乳腺癌细胞系MCF-7为阳性对照，观察了培养第11代人骨髓MSC在软琼脂中的生长情况。发现MCF-7可在软琼脂中生长，而人骨髓MSC不具备这种能力。结果间接证明MSC未发生转化。

图10. MSC和MCF-7细胞双层软琼脂中生长情况观察。
注： 在6孔培养板中加入0.6%的低熔点琼脂，待凝固后分别加入含0.3%琼脂和10000个MCF-7或MSC的悬液，培养2周后镜下观察。MCF-7细胞形成大量的集落，而MSC无细胞集落形成。放大倍数：100X。
Ø 热源含量小于或等于0.0625IU/ml，低于常用药典规定的灭菌注射用水最高限量（0.25IU/ml）。
*本手册显示的所有结果，均为该试剂提供者在其实验室完成，对于任何非结论性的差异和误差，研究者不承担任何责任。结果所有权归试剂研究者所有，在研究者未准许情况下，任何人不得以任何方式使用其中的内容。