特点:
1.
产品仅用于科研即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果.
禽疱疹病毒通用PCR试剂盒研发需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
产品仅用于科研步骤操作:
3.
禽疱疹病毒通用PCR试剂盒研发入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超纯水,充分混合均匀即可。溶液 A 工作液可室温放置,但最好在一周内用完,不要长期放置。一
次检测一个样品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足够 10 个样品。如果待测样品数量为其他数字,配制的溶液 A 工作液的体积需要做相应的调整。
4. 在标记好的 N+2 个离心管中,加入 1-5mg 固体样品(半粒芝麻大小)或 5uL 液体样品待测样品。在样品制备阳性对照中加入 5uL 阳性对照,在样品制备阴性对照中加入 5uL 水。
5. 在每个管中加入 100 uL 溶液 A 工作液,确保固体样品被溶液淹埋,如果是液体样品则震荡混匀。
6. 95℃保温 10 分钟。
7. 待冷却到常温后加入 10uL 溶液 B 并混匀得 DNA 释放液。每个样品得到的 DNA释放液足够进行 50-100 次 PCR。
反应五要素:
产品仅用于科研参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
小鼠 RELB ELISA Kit
小鼠V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒 ,英文名: RELA ELISA Kit
小鼠V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)ELISA试剂盒 ,英文名: MYC ELISA Kit
小鼠V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)ELISA试剂盒 ,英文名: JUN ELISA Kit
小鼠VI型胶原(COL6)ELISA试剂盒 ,英文名: COL6 ELISA Kit
小鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)ELISA试剂盒 ,英文名: VGF ELISA Kit
小鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA试剂盒 ,英文名: FOS ELISA Kit
小鼠V-Ets骨髓成红细胞增多症病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA试剂盒 ,英文名: ETS1
禽疱疹病毒通用PCR试剂盒研发ELISA Kit
小鼠V-Erb小鼠B2红白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)ELISA试剂盒 ,英文名: ErbB3 ELISA Kit
小鼠VEGF共调节趋化因子1(VCC1)ELISA试剂盒 ,英文名: VCC1 ELISA Kit
小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒 ,英文名: UGCG ELISA Kit
小鼠T-型电压依赖钙离子通道α1H亚基(CACNα1H)ELISA试剂盒 ,英文名: CACNα1H ELISA Kit
小鼠T-细胞激活连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒 ,英文名: LAT ELISA Kit
小鼠Toll样受体9(TLR9)ELISA试剂盒 ,英文名: TLR9 ELISA Kit
小鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒 ,英文名: TLR4 ELISA Kit
小鼠Toll样受体3(TLR3)ELISA试剂盒 ,英文名: TLR3 ELISA Kit
小鼠Toll样受
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体2(TLR2)ELISA试剂盒 ,英文名: