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细胞名称 豚鼠皮肤细胞;GP-S1价格
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雌性豚鼠的皮肤组织。2001年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
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豚鼠皮肤细胞;GP-S1价格 |
生长特性 |
贴壁生长 |
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主要功能:
(1) 血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2) 表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3) 与血管疾病的进展和稳定有关。
生理变化:
(1) 主动脉硬化。
(2) 主动脉瘤
(3) 主动脉钙化。
基本特性:
(1) 组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2) 鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3) 原代细胞培养末期液氮冻存。
(4) 每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5) 肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6) 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
豚鼠皮肤细胞;GP-S1价格实验要点及说明 :
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
hain) ELISA Kit 人肌球蛋白轻链
ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit 人α-辅肌动蛋白3
hs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 人超敏C反应蛋白
Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit 人肌钙蛋白Ⅰ
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit 人血清淀粉样蛋白A
Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit 人热休克蛋白60
HSP gp96(Huma
trix metallo 规格: 96T/48T 英文名称
Human MMP-4 ELISA Kit 人基质金属蛋白酶4(MMP-4) 规格: 96T/48T 英文名称
Human Matrix metalloproteinase-3—MMP-3 ELISA kit 人基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA kit 规格: 96T/48T 英文名称
Human Matrix metalloproteinase-2—MMP-2 ELISA kit 人基质金属蛋白酶2(MMP-2) 规格: 96T/48T 英文名称
Human Matrix metalloproteinase-13—MMP-13 ELISA : 96T/48T 英文名称
Human cAMP Elisa Kit 人环-磷酸腺苷(cAMP) 规格: 96T/48T 英文名称
豚鼠皮肤细胞;GP-S1价格Human Cyclic guanosine monophosphate ELISA Kit 人环-磷鸟苷(cGMP) 规格: 96T/48T 英文名称
Human Cyclosporin A ELISA Kit 人环胞霉素A(CSA)ELISA Kit 规格: 96T/48T 英文名称
Human Erythropoietin soluble receptor ELISA Kit 人红细胞生成素受体(EPO sR) 规格: 96T/48T 英文名称
Human Erythropoietin ELISA Kit 人红细胞生成
Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit 人热休克蛋白糖蛋白96
CT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit