产品详情
货号	YB-H1124
中文名称	小鼠小肠内分泌细胞
英文名称	STC-1
规格	T25
价格	1580
形态特性	上皮样
生长特性	贴壁生长
特征特性
培养条件	DMEM+10%FBS
传代方法	1:3传代；2~3天1次。
冻存条件	无血清细胞冻存液
STR
备注	本库的细胞系（株）仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的。使用者不得将本库细胞系（株）转让给第三者。

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml新的完全培养基。
4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
二．细胞处理：
1）  复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）  细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.     弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.     加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.     按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4 . 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议客户冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类；
     1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
     2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10E6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
     3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、注意事项：
1 收到细胞后首先观察 T-25 瓶是否有损坏、 漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞，若大部分细胞漂浮，置于培养箱隔夜观察， 大部分漂浮细胞重新贴壁，表明细胞活力正常， 继续培养， 剩余漂浮的细胞可以去掉； 若大部分细胞仍然不贴壁，将漂浮的细胞离心收集，用台盼蓝染色鉴定细胞活力， 并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后前 3 天不同倍镜各拍几张细胞照片，记录细胞状态， 如细胞出现问题请于一周内与本公司销售联系，以便于更好的帮您解决问题。
备注：请老师以随货发出的细胞说明书为主。