中文名称：线粒体膜电位检测试剂盒
英文名称：Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-
产品规格：>00次
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线粒体膜电位检测试剂盒本试剂盒是一种以JC-为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-为单体(monomer)，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-单体的最大激发波长为54nm，最大发射波长为529nm；JC-聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测00个样品；对于2孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
试剂盒组分：
JC-(200X)——————00μl/管，共5管
超纯水————————90ml
JC-染色缓冲液(5X)——80ml
CCCP(0mM)——————20μl
储存条件：-20℃。

注意事项：
、悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不仅与活细胞数成比例，也受作用时间的影响，因此当样品较多时测定的OD 值可能随时间而变。
3、MTT 溶液为黄色，需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。MTT 溶液在4℃或较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
PPOH （50 mg）     2（2propynyloxy）benzenehexanoic acid； PPOH
Methyl Monensin     Monensin Methyl Ester
（R）Prostaglandin E （5 mg）     9oxo。alpha。，RdihydroxyprostEenoic acid； epi PGE|（R）PGE； （R）Prostaglandin E
PP3 （0 mg）     NSC 0； phenylHpyrazolo[3,4d]pyrimidin4amine
25ENBOMe （hydrochloride） （ mg）     2（4ethyl2，5dimethoxyphenyl）N（2methoxybenzyl）ethanamine， monohydrochloride； 2CENBOMe； 25ENBOMe （hydrochloride）
TQ2 CPG     Tide Quencher 2 CPG [TQ2 CPG] 000
wo7iumxy7noXIDE,0NSOLUTION,0N超级00MLRT
油　INA
Giemsa′sStain吉氏色素克BR，99%
香草酸 Vanillic acid,≥97.0% 25G 通用试剂
拂橡胶 I Fluoro gum I
MAGENTALOADINGDYE,0X5ML#N/A
本务同 Vclqrophqnonq 00
2Acetyl5bromo4metxylthiopxene 990
2,6二二苯甲酮 2,6Difluorobenzophenone,≥98.0% 58 5G 通用试剂
三(2羧乙基)膦盐酸盐/三(2羰基乙基)0盐酸盐/三(2甲酰乙基)膦盐酸盐/三(2羧乙基)0盐酸盐/三(2酰乙基)0盐酸盐/TCEP 高，98% /5克 进分
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变性裂解液含有SDS
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操作规程
、在96孔板加入细胞00μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入00微升5000～0000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
线粒体膜电位检测试剂盒8、结果分析
 a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（完全培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)