中文名称:
台盼蓝染色液(0.4%)
英文名称:0.4% Typan Blue Solution
产品规格:20ml
发货周期:~3天
台盼蓝染色液(0.4%)台盼蓝(Trypan Blue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。
本品为溶于生理盐溶液的0.4%(w/v)台盼蓝染色液,以无菌形式提供,细胞培养级别。
使用方法
)对于悬浮细胞,离心收集细胞,充分清洗后,用适当缓冲液如PBS,HBSS重悬制成单细胞悬液;对于贴壁细胞,先用胰酶消化细胞,再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。
2)取0.5ml单细胞悬液,按照:比例与0.5ml 0.4%台盼蓝染色液充分混匀,室温染色3~0min。
【注】:因台盼蓝具有细胞毒性,染色时间过久会导致部分死细胞染色,干扰计数。
【注2】:若细胞密度比较高,可取0.2ml单细胞悬液,经适当缓冲液稀释到0.5ml,之后再用0.5ml 0.4%台盼蓝染色液染色。
3)取少量上述染色细胞加入血细胞计数板,于显微镜低倍镜下计数,分别计算着色细胞(即损伤细胞和死细胞)和总细胞。
【注】:用移液枪加染色细胞时,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。
【注2】:mm2方格内细胞数通常控制在20-50 cells,当细胞数超过200个,需重新调整稀释倍数。
4)按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比,
a,计算每ml细胞数目:Cells/ml=mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×04;【注】:此时的稀释倍数为:步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数
b,总细胞数目:Total cells=(Cells/ml)×最初制备单细胞悬液的总体积
c,细胞活力值:Viability(%)=(总细胞数-总着色细胞数)/总细胞数×00
【注】:通常情况,健康的对数期培养细胞,活细胞至少占到95%。
储存条件:室温,有效期2年

注意事项:
、悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不仅与活细胞数成比例,也受作用时间的影响,因此当样品较多时测定的OD 值可能随时间而变。
3、MTT 溶液为黄色,需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。MTT 溶液在4℃或较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
PAD Substrate ( ea) PAD Substrate
ZWEHDFMK, Caspase5抑制剂(氟) Caspase5 Inhibitor ZWEHDFMK
NU 7026 (50 mg) 2(4morpholinyl)4Hnaphtho[,2b]pyran4one; LY26|DNAPK Inhibitor II; NU 7026
Kasugamycin (hydrochloride) ( g) 3O[2amino4[(carboxyiminomethyl)amino]2,3,4,6tetradeoxyαDarabinohexopyranosyl]Dchiroinositol, monohydrochloride
Caspase3/7 Inhibitor I (5 mg) 5[[2(methoxymethyl)pyrrolidinyl]sulfonyl]Hindole2,3dione; Caspase3/7 Inhibitor I
Simvastatin (0 mg) MK 3, Simvastatin, 2,2dimethylS,2,3R,7S,8S,8aRhexahydro3,7dimethyl8[2[(2R,4R)tetrahydro4hydroxy6oxo2Hpyran2yl]ethyl]naphthalenyl ester, butanoic acid
N(2乙酰基)亚基二乙酸二钠盐30次/00ul/支
808胞苷5’三二钠盐Cytidine5'triphosphate diwo7ium salt dihydrate
测试盒(化学法测NO2)shēng huà shì jì容量:RT25块/盒
6并三... 6Chlorohydroxibenzotriazol,99% 268 500G 通用试剂
(s)()α基苄安 LPhqnylqthylcminq 863
HYBRIDIZATIONCOCKTAIL,0%formide杂交混合物,0%甲先胺微混浊液体FROZENsigma
56碱性品红;盐基品红;碱性新品红;玫瑰本胺盐酸盐Fuchsin basic;Magenta;Basic Magenta;Basic rubin;Basic violet ;C.I. 50
EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二钠,二水生物技术级白色结晶粉末RTsigma
2硝基咪唑 2Nitroimidazole,98% 527 G 通用试剂
D甘露醇 DMannitol (ACS reagent, ≥99%) 8 500G 碳水化合物
小鼠再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA试剂盒 ,英文名: REG3γ ELISA Kit
白介素2受体(IL-2R)ELISA检测试剂盒MonkeyIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T
犬抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素(AVP)免疫试剂盒 Dog arginine vasopressin,AVP ELISA kit
英文名称HumanPAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISAKit规格:96T/48T
化线粒体II型L-3羟酰基-CoA脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量检测试剂盒20次
RatInsulieceptorβ,ISR-βELISA试剂盒大鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠白介素β (IL-β)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat mammary carcinoma marker-ca53 -CA53ELISA 大鼠癌标志物-CA53ELISA试剂盒
Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA试剂盒人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
转基因产品35S试剂盒20次
HumanSolubleClusterofdiffereiation2,sCD2ELISAKit人可溶性CD2(CR2/sCD2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
台盼蓝染色液(0.4%)操作规程
、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)