中文名称:
Hoechst 33342/PI双染试剂盒
英文名称:Hoechst 33342/PI Double Stain Kit
产品规格:00T
发货周期:~3天
Hoechst 33342/PI双染试剂盒Hoechst 33342/PI 双染试剂盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)双染的方法以区分凋亡细胞和坏死细胞的试剂盒。其检测原理是:细胞核荧光染料Hoechst 33342可以穿透细胞膜,嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。对于正常细胞,其可少许进入细胞膜使其染上低蓝色。而凋亡细胞由于细胞膜通透性增强,从而使得进入凋亡细胞内的Hoechst 33342明显多于正常细胞,荧光强度比正常细胞要高。另外,细胞发生凋亡时染色质会固缩,从而使得染料能更有效和聚集的结合于DNA,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受损而不能有效的将Hoechst 33342排除到细胞外使其在细胞内的积累增加,这些特征都使得凋亡细胞经染色后荧光会比正常细胞明显增强。但细胞核荧光染料PI不能穿透细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞,即活细胞对PI染料拒染而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性在早期即已丧失,可被PI染色。
经上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光+弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光+强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光+弱蓝色荧光。
本试剂盒染色快速方便,可用一步法或者两步法进行染色。使用流式细胞仪检测时,无需稀释等配制过程,也无需再准备其它任何溶液。本试剂盒足够检测00个样品,每个样品的细胞数量可达05-06个。
注意事项
) Hoechst 33342、PI对人体有害,请注意适当防护;
2) Hoechst 33342、PI需避光,整个实验过程尽量避光操作;
3) 荧光染料均存在淬灭情况,建议染色后需尽快检测;
4) Hoechst 33342 与细胞孵育时间不宜过长,一般控制在20min以内。太长容易引起该染料的发射光谱由蓝光向红光迁移,导致红色荧光和蓝色荧光比例改变。
5) 如果用于组织样品检测,则必须把组织消化制备成单细胞悬浮液后才可以进行检测。
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期2个月

注意事项:
、悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不仅与活细胞数成比例,也受作用时间的影响,因此当样品较多时测定的OD 值可能随时间而变。
3、MTT 溶液为黄色,需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。MTT 溶液在4℃或较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
NnonanoylLHomoserine lactone (0 mg) N[(3S)tetrahydro2oxo3furanyl]nonanamide; C9HSL; NnonanoylLHomoserine lactone
Sinomenine (hydrochloride) (500 mg) Cucoline|NSC 02; (9a,a,a)7,8didehydro4hydroxy3,7dimethoxymethylmorphinan6one, monohydrochloride (:)
EDANS标记的Asp天冬氨酸 FMOCAsp(EDANS)OH
Psoralidin (5 mg) 3,9dihydroxy2(3methyl2butenyl)6Hbenzofuro[3,2c][]benzopyran
norMephedrone (hydrochloride) (0 mg) 2amino(4methylphenyl)propanone, monohydrochloride; Mephedrone Metabolite|NSC 607; norMephedrone (hydrochloride)
ATRA; Tretinoin; NSC 28; Vitamin A Acid; alltrans Retinoic Acid; NSC 25 Retinoic acid
四乙酰呋核糖,英文名或英文缩写:,2,3,5TetraOacetylβDribofuranose,级别:,98%,规格:0毫升
LThreonine 5g Sigma分装
DDM月桂酰基麦芽糖苷500毫克高,98%
甜菜减言醋盐 Bqtcinq xy7nochloridq;Lycinq xy7nochloridq;Oxynqurinq xy7nochloridq;TriMqthyl glycocoll xy7nochloridq;CcrboxyN,N,NtriMqthylMqthcncMiniuM
4录α奈酚,英文名或英文缩写:4CN,级别:IND,规格:克
S基L半胱安醋 SMqthylLcystqinq 44
3metxoxycarbonyl5nitnopxenylboronic acid 208
R(+)α甲基苄胺 (R)(+)αMethylbenzylamine,98% 869 25ML 通用试剂
DL精酸盐酸盐/盐酸DL精酸/DLArginine HC BR,99% 25克 国产/进口
小鼠乙酰辅酶A(acetyl-CoA)ELISA试剂盒 ,英文名: acetyl-CoA ELISA Kit
小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-40)ELISA检测试剂盒Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-40ELISAKit 96T/48T
人胶原交联(PYD)免疫试剂盒 Human pyridinoline,PYD ELISA Kit
Ratai-thrombieceptor,AELISAKit大鼠抗凝血酶受体(A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组蛋白H3-K4乙酰化检测试剂盒0/20次等
Mouseai-endothelialcellaibody,AECAELISA试剂盒小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠白介素33(IL-33)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-33 ELISA Kit
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA检测试剂盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T
人T细胞活化连接蛋白(LAT)免疫试剂盒 Human LAT ELISA Kit
英文名称MouseEpinephrineELISAKit小鼠(Epinephrine)规格:96T/48T
Hoechst 33342/PI双染试剂盒TEM电镜石蜡切片免疫组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒(含HRP二抗)20次
RabbitLysozyme,LZMELISA试剂盒兔溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
操作规程
、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)