细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)保存条件:-20℃冰冻保存一年。
工作原理:
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡,其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚,时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活,细胞自身的染色质或DNA 被切割,出现单链或双链缺口,并产生与 DNA 断点数目相同的3’-OH 末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以将地高辛标记的dUTP(DIG-dUTP)标记至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 结合在 DNA 断点部位,可以通过生物标记的抗地高辛抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后,再结合链酶亲和素-荧光素 FITC(SABC-FITC)。FITC 在 490-495nm 激化,在 520-530nm 发射荧光,呈黄绿色。凋亡的细包核呈黄绿色,从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
试剂盒内容:
.标记缓冲液(Labeling Buffer)ml
2.末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封闭液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗地高辛抗体(× 00)20μl
6.SABC-FITC(× 00)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.抗体稀释液 4ml
以下是细胞生物学试剂详细说明:

注意事项
. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于×05,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
产品特点:
.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用,
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
操作步骤:
、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。000~2000g 离心 min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
NFAT Inhibitor (5 mg) LmethionylLalanylglycylLprolylLhistidylLprolylLvalylLisoleucylLvalylLisoleucylLthreonylglycylLprolylLhistidylLαLglutamic acid; NFAT Inhibitor
Voriconazole (50 mg) DRG 030|UK 0|VRC|Vfend; (αR)α(2,4difluorophenyl)5fluoroβSmethylα(H,2,4triazolylmethyl)4pyrimidineethanol
六水化钴(5GM) Cobalt Chloride, 6H2O, CAS ; ≥98%
25(S)27hydroxy Cholesterol (5 mg) (25S)cholest5ene3β,26diol; (25S)26hydroxy cholesterol; 25(S)27hydroxy Cholesterol
NG,NGdimethylLArginine (hydrochloride) (25 mg) N5[(dimethylamino)iminomethyl]Lornithine, dihydrochloride; ADMA; NG,NGdimethylLArginine (hydrochloride)
3’[αAminopmethoxyhydrocinnamamido]3’deoxyN,Ndimethyladenosine dihydrochloride Puromycin Dihydrochloride
TBSBUFFER,20XLIQUIDTBS缓冲液 20X 浓缩液超级4LRT
(a环状糊精)
固深红GBC,英文名或英文缩写:Fast Garnet GBC salt,级别:超,98%,规格:5克
头孢匹安 CqfpircMidq 70
WATER,STERILE,NUCLEASEFREE无菌水(无核酸酶,DEPC处理过)生物技术级透明无色液体RTsigma
,,3,3四基shēng huà shì jì容量:0.25毫升
399Manganese
兔血浆米
β乳球蛋白 βLactoglobulin from bovine milk,≥90% 90232 50MG 通用试剂
流醋羌安 xy7noxylcminq sulfctq 00
小鼠胰高血糖素样肽(GLP-)ELISA试剂盒 ,英文名: GLP- ELISA Kit
小鼠叶酸(FA)ELISA检测试剂盒MouseFolicacid,FAELISAKit 96T/48T
人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)免疫试剂盒 Human bFGF ELISA Kit
RatapoproteinB00,apo-B00ELISAKit大鼠载脂蛋白B00(apo-B00)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组蛋白H3-S00酸化检测试剂盒0/20次等
Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISA试剂盒小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体(OMgp-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒
Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit 人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)HumanCiliaryNeuroophicFactor,CFELISA试剂盒人睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组氨酸(leucine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次
humanS00calciumbindingproteinA8/calgranulinA,S00A8ELISAKit人S00钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S00A8)ELISA试剂盒规格:96T/48T