姬姆萨染色液(吉姆萨染液)
产品及特点姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa 染色 原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的 显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱 性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常 与瑞氏染液联合使用。本产品以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含本公 司特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果,经常用于组 织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸 性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细 胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称 为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为 中性物质。
本产品由溶液 A(Giemsa Stain 储存液,10x)和溶液 B(磷酸盐缓冲 液)组成,溶液 A:溶液 B=1:9 混合成工作液后使用;亦可以分开使用,即 先用 Giemsa Stain 染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效 果。
规格及成分 成份 编号 塑料袋包装
溶液 A 170502A 10 mL
溶液 B 170502B 100 mL
使用手册 1 份
运输及保存 常温运输,室温避光保存,有效期一年。
自备试剂 甲醇、蒸馏水、乙醇、0.1%~0.5%乙酸、3%重铬酸钾等
使用方法 以下步骤仅供参考:
一、一步法涂片染色
1. Giemsa 工作液的配制:
按照溶液 A:溶液 B=1:9 混合,即取 1 份溶液 A(Giemsa Stain 储存 液,10x)加入到 9 份溶液 B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成 Giemsa 工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 1~3min。
3. 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加 Giemsa 工作液覆盖涂片,室温滴染 15~30 min。
4. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
5. (可选)0.1%乙酸分化数秒。
6. 干燥,镜检。
二、两步法涂片染色
1. Giemsa 工作液的配制:
按照溶液 A:溶液 B=1:4 混合,即取 1 份溶液 A(Giemsa Stain 储存
液,10x)加入到 4 份溶液 B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成 Giemsa
工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 1~3 min。
3. 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加 Giemsa 工作液覆盖涂片,室温滴染 10~15min。
4. 加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置 15 min。
5. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
6. 干燥,镜检。
二、组织切片染色
1. Giemsa 工作液的配制:
按照溶液 A:溶液 B=1:9 混合,即取 1 份溶液 A(Giemsa Stain 储存液,10x)加入到 9 份溶液 B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成 Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 新鲜组织立即置于 Regaud 固定液(按 3%重铬酸钾:甲醇=4:1 配置,用前混匀,1-2 天即失效)固定 2 天,期间更换 1 次固定液。
3. 3%重铬酸钾固定 1 天。
4. 流水冲洗 16 个小时或过夜。
5. 照常规脱水、包埋。
6. 切片厚度约为 5μm,常规脱蜡至水。
7. 蒸馏水清洗 2 次,每次 1~2min。
8. 入含 Giemsa 工作液染缸,浸染 18~24h。
9. 蒸馏水稍清洗。
10. 0.5%乙酸清洗 1~2min。
11. 自来水稍微冲洗。
12. 用无水乙醇迅速脱水 3 次,每次 5~10s。
13. 二甲苯透明,中性树脂封固。
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