植物丝氨酸蛋白酶(PRSS）试剂盒
基本信息
产品名称：
植物丝氨酸蛋白酶(PRSS）试剂盒
英文名称：
PRSS
国产/进口：
国产
产地/品牌：
上海康朗生物科技有限公司
型号：
48T/96T
参考报价：
1480
销售商：
总点击数：
152
更新日期：
2025-05-14
产品类别：
性能参数
植物丝氨酸蛋白酶(PRSS）试剂盒
植物丝氨酸蛋白酶(PRSS）试剂盒（酶联免疫吸附试验法）使用说明书
仅供体外研究使用，不用于临床诊断
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中植物丝氨酸蛋白酶(PRSS）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
[实验原理]
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被植物丝氨酸蛋白酶(PRSS）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠便隐血(FOB)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
[样本处理及要求]
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
[需要而未提供的试剂和器材]
1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
[试剂盒组成]
备注：
1. 标准品浓度依次为：400、200、100、50、25、12.5 pg/mL
2. 经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
[注意事项]
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
[试剂准备]
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
[操作步骤]
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
[实验结果计算]
以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。[试剂盒性能]
1. 检测范围：12.5 pg/mL – 400 pg/mL。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。
[说明]
1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，本产品可能存在一定的质量技术风险。2.最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。
3.不同批次的同一产品可能会有少许差别，如：检测限、灵敏度以及显色时间等，请依据试剂盒内说明书进行实验操作，网站电子版说明书仅作参考。
4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到最佳的检测结果。
5.本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。
6.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
7.若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。
8.某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。检测步骤：
| 实验前30 min拿出试剂盒，恢复至室温，加入标准品/样本前，请洗板3次并甩干 |
| 加入100ul标准品及检测样本到反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育90min |
| 加入100ul生物素化抗体工作液至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育60min |
| 加入100ul酶结合物工作液至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育30min |
| 加入100ul显色底物至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育15min |
| 加入50ul终止液，即刻用酶标仪450nm波长下测量OD值（5分钟内） |
在选取的健康植物血浆、细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的植物PRSS，计算回收率。
| 样本类型 | 平均回收率（%） | 范围（%） |
| 血浆 | 97 | 92-102 |
| 细胞培养上清 | 98 | 94-102 |
分别在选取的4份健康植物血浆和细胞培养上清中加入高浓度植物PRSS，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。
| 稀释比例 | 回收率（%） | 血浆 | 细胞培养上清 |
| 1：2 | 平均收率（%） | 96 | 97 |
| 范围（%） | 94-100 | 93-101 | |
| 1：4 | 平均收率（%） | 97 | 98 |
| 范围（%） | 94-100 | 93-103 |
公司简介
上海康朗生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售、服务于一体的一家生物高新技术企业，专营基因、蛋白、抗体、Elisa试剂盒、细胞生物学，分子生物学等高生物产品。总部位于上海，并在北京、广东，江西，吉林等全国30多个省市设有分公司和代理机构。涉及的产品被中国科学院、清华、北大、复旦，上海交大，复旦医学院，上海中医药大学，华东师范大学，第二军医大学，曙光医院，浦东新区人民医院等知名科研院所广泛使用，可靠而稳定的质量和完善的售后服务确立了良好的KALANG品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨"的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及先进的仓储和物流系统。KALANG品牌已经得到全国科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的名牌产品。 公司拥有一批专业的博士、硕士研发人员，专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，KALANG公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达3000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，我们的技术保证了我们产品质量，高生产效率，高纯度的产品和超强的生物活性，同时又具有竞争力的价格。 KALANG谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买KALANG产品的用户都能够得到专业的咨询和售后服务。 康朗生物公司坚持与国际接轨，注重和国际先进企业的合作与交流，目前已经和Sigma、Axygen、Merck、Roche、Amresco、Millipore、Whatman、Corning、Fluka、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Applichem、Acros以及Dragon等著名企业结成紧密的合作伙伴关系，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多知名品牌合作，为广大生物科研工作者提供优质、专业的服务。公司理念：整合你我资源，服务生命科学"。KALANG公司期待与各同行精诚合作，为广大科研工作者提供更加优质的产品和服务。
售后服务
符合以下条件，可以进行售后：
客户收到货物后10天之内，发现商品有明显的质量问题的。
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