荷叶染料法PCR鉴定试剂盒PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
以下是PCR鉴定试剂盒订购信息:
产品名称:
荷叶染料法PCR鉴定试剂盒
英文名称:Folium nelumbinis
产品规格:50次
运输:低温
保存:负20度
有效期:一年
货期:现货

储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果:将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
应用案例
样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分.
幽门螺杆菌抗体 helicobacter pylori antibody 100 3200 ng/ml 10
幽门螺杆菌抗原 helicobacter pylori 62.5 2000 ng/ml 10
黄热病毒抗原 YFV-Ag 0 10
黄热病毒IgG抗体 YFV-IgG antibody 0 10
凋亡相关蛋白TFAR19 TFAR19 0.25 8 ng/ml 0.1
拟除虫菊酯 synthetic pyrethroids 0.125 4 ng/ml 0.1
乙酰辅酶A Acetyl CoA 10 320 U/L 1
查尔酮合成酶 Chalcone synthase 2 64 U/L 0.1
卵黄蛋白原 Vitellogenin 20 640 ng/mL 1
抗鼠抗体 antimous antibody 25 800 ng/ml 1
流行性脑膜炎球菌抗原 Epidemic Meningococcus 2.5 80 ng/mL 0.1
环磷酸腺苷 cyclic adenosine monophosphate 0.375 12 pmol/mL 0.1
围脂滴蛋白 Perilipin 5.625 180 ng/L 1
CCDC49抗体 CCDC49 Antibody 0.25 8 ng/mL 0.1
隐孢子虫 Cryptosporidium 0 10
禽I型腺病毒抗体 FAV-Ⅰ-Ab 3.75 120 IU/ml 0.1
钙依赖蛋白激酶 calcium-dependent protein ki-nases 2 64 U/L 0.1
3-(N-Morpholino)propanesulfonic acid(MOPS)分子式:C7H15NO4S分子量:209.30
4-丙磺酸基吗啉 3-吗啉丙磺酸
3-吗啉丙磺酸 1132-61-2
3-(N-Morpholino)propanesulfonic acid(MOPS)分子式:C7H15NO4S分子量:209.30
4-丙磺酸基吗啉 3-吗啉丙磺酸
N,N-(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 10191-18-1
BES分子式:C6H15NO5S分子量:213.20
N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,N,N-二(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,2-(二乙醇氨基)乙磺酸SA293
N,N-(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 10191-18-1
N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,N,N-二(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,2-(二乙醇氨基)乙磺酸SA293
荷叶染料法PCR鉴定试剂盒BES分子式:C6H15NO5S分子量:213.20
N,N-(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 10191-18-1
BES分子式:C6H15NO5S分子量:213.20
N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,N,N-二(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,2-(二乙醇氨基)乙磺酸SA293
N,N-(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸 10191-18-1
BES分子式:C6H15NO5S分子量:213.20
N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,N,N-二(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸,2-(二乙醇氨基)乙磺酸