特别提示:包括病毒采集及保存试剂盒3.0(灭活病毒,免提取)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:病毒采集及保存试剂盒3.0(灭活病毒,免提取)
英文名称:Extraction-free Virus Collection and Transport Kit
产品货号:BTN200201
产品规格:50次
本试剂盒是我司开发的第三代病毒采运试剂盒,专门用来保存、运输、保存和免提取释放病毒核酸的试剂盒。
产品特点:
1.含拭子,可用于从人和动物的各种组织、器官和部位样品采集样品,包括咽喉、鼻腔、口腔、生殖道、创口等等部位。
2.能即刻灭活病毒,使其快速失去活性。避免其对后续操作人员的第二次感染。
3.含核酸保护剂,在数天时间内能使DNA和RNA无明显降解。
4.免核酸提取,保存液加上释放剂后可以直接作为核酸扩增的模板,它的成分跟后续的PCR、RT-PCR、LAMP或RT-LAMP兼容。
5.一次取样足够几十次核酸扩增。
6.在2-25℃范围内保存时间可以长达10天(仅对DNA样品)和4天(对RNA样品)。
7.本试剂盒足够处理50次样品采集和保存。
8.本产品不能用来保存活体病毒,不能将其研究病毒的细胞毒性。
9.本产品仅供科研使用。
试剂盒组成:
组分 |
规格 |
含2mL样品管(装0.6mL病毒保存液3.0) |
50管 |
含15cm长拭子(3cm处有折断点) |
50个 |
中和液 |
30mL |
保存:常温,有效期2年
使用方法:
注意:尽管本试剂盒的保存液含有病毒灭活剂,但不能排除离心管外在取样时污染了病毒,因此操作人员必须按处理传染性样品的方法进行相应的防护,必须在合乎国家规定的实验室进行所有操作。
一、病毒采集、运输和保存
1.采样前,在采样管的标签上标注相关样品信息。
2.根据不同的采样要求,用采样拭子在相应的部位和器官采样。具体采样方法如下:
a)鼻拭子:将拭子头轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
b)咽拭子:用拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁后退出。
c)尿道采样:
男性:用拭子插入尿道约2cm处旋转,静止数秒后退出。
女性:抹去宫颈口粘液,用拭子插入宫颈管1-2cm处后退出。
d)其他拭子采样:本手册暂不详述。
3.迅速将拭子放入本采样管中(含病毒运输液),将拭子在样品管中旋转15秒
4.将采样拭子在折断处折断,丢弃把柄端,旋紧管盖。
5.新鲜采集的标本应在4℃-25℃下96小时(4天)内运送至实验室,未能96小时送至实验室的,应置于-70℃或以下保存,DNA样品也可以放-20℃保存。标本送至实验室后应尽快进行核酸提取,24小时内能进行核酸提取的可置于4℃保存,如不能则应置于-70℃或以下保存,DNA样品也可以放-20℃保存。
6.用镊子夹住拭子柄端,靠着样品管的管壁将拭子中的液体挤出,弃拭子。
二、免提取核酸扩增
本产品为免核酸纯化保存液,故可以直接作为模板进行核酸检测。
1.在0.6mL病毒保存样品中加入0.6mL的中和液,震荡5-10秒。
2.室温放置10分钟。
3.混合液可以直接用做PCR、RT-PCR、LAMP和RT-LAMP扩增的模板。
4.未用完的部分模板可以放-80℃长期保存。对DNA病毒样品,也可以放-20℃。
注意:由于病毒有传染性,因此实验过程中的所有垃圾需要按有传染性物质处理。操作人员也必须相应做好防护。
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名称:人类cDNA
货号:WE0227
规格:100μl(20次反应)
本产品是以人胎盘组织RNA为模板,Oligo(dT)以及Random为引物, 用百奥莱博的高灵敏度的逆转录酶反转录得到的PCR即用型cDNA,可用于PCR实验的阳性对照。纯度:OD260/280≈1.8
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
试剂 |
50μl体系 |
终浓度 |
10×Taq PCR Buffer with Mg2+ |
5μl |
1× |
dNTP Mix,2.5 mM each |
4μl |
200μM each |
Forward Primer,10μM |
2μl |
0.4μM |
Reverse Primer,10μM |
2μl |
0.4μM |
Human Placenta cDNA |
5μl |
|
Taq DNA Polymerase,2.5 U/μl |
0.5μl |
|
RNase-Free Water |
补水至50μl |
|
注意:
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)镁离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×PCR Buffer中已经含有15 mM镁离子,可根据丌同的引物对和模板来调节镁离子浓度,由此优化反应体系。
2、将混合好的液体进行PCR反应。
3、结果检测:反应结束后取5μl反应产物,加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
储存条件:-20℃,避免反复冻融

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