Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的吞噬检测试剂盒，吞噬作用定义为细胞对质膜内的颗粒的细胞摄取。通过吞噬和破坏入侵的微生物，吞噬作用的过程对先天免疫反应至关重要。通过清除凋亡小体，维持组织稳态和重塑也需要吞噬作用。吞噬作用的摄取机制取决于颗粒的大小，受体 - 配体相互作用和细胞骨架的参与。一旦内化，吞噬体与溶酶体融合形成用于消化的第二吞噬溶酶体，导致pH逐渐降低。我们的Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒使用独特的pH依赖性Protonex 600红色乳胶珠结合物。与大多数现有荧光染料不同，Protonex 600红乳胶珠缀合物在细胞外是非荧光的。然而，当它们在酸性吞噬体/吞噬溶酶体内时，其荧光显着增加。这种特性使其易于使用而无需台盼蓝淬灭步骤和用于研究吞噬作用及其规定的强大工具。 Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒还包括绿色荧光细胞活力染料，可通过荧光显微镜同时检测活细胞和吞噬作用过程。该测定还可以适用于荧光微量板读数器和流式细胞术检测。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒。 

操作步骤

1.将Cytochalasin D作为阳性对照或DMSO或您的测试化合物添加到每个孔中。 注意：测定中使用的细胞松弛素D的浓度应针对每个单独的细胞系进行优化。

2.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

3.每孔加入12.5μLProtonex 600 Red-Latex Beads Conjugate溶液（12X）。

4.将板在细胞培养箱中孵育4小时。 注意：每个细胞系的用户应优化孵育时间。

5.每孔加入12.5μLCytoTrace Green工作溶液（12X）。

6.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

7.用1X PBS洗涤板两次。

8.用德克萨斯红过滤器（Ex / Em = 570 / 600nm）和具有FITC过滤器的CytoTrace Green（Ex / Em = 490 / 525nm）观察细胞内的吞噬作用。

数据分析

图示：使用Cell Meter 荧光吞噬作用测定试剂盒（Cat＃21225）检测RAW 264.7细胞中的吞噬作用。 将RAW 264.7细胞与（B）或不用（A）细胞松弛素D孵育30分钟，然后加入Protonex 600 Red-Latex Beads在生长培养基中并孵育4小时，然后加入Cell Tracker并孵育30分钟。 使用Keyence荧光显微镜拍摄图像。