B6-Rag1-KO

品系名称：B6/JGpt-Rag1 ^em1 /Gpt

品系类型：Knock-out

品系编号：T004753

背景：C57BL/6JGpt

品系描述

Rag1（Recombination-activating gene 1）是催化VDJ重组的酶复合物的组成部分 ^[1] 。Rag1敲除纯合小鼠的VDJ重组不能正常进行，T细胞和B细胞无法正常发育成熟。因此，Rag1敲除小鼠中没有成熟CD3+ TCRαβ+ T细胞，胸腺中细胞量比野生型或杂合子低15-130倍，胸腺细胞是CD8-CD4-且大多为IL2R+，脾脏及骨髓中检测不到IgM或IgD，显示成熟的B细胞完全缺失 ^[2] 。与Prkdc缺失的Scid模型相比，Rag1敲除模型的成熟淋巴细胞缺失更彻底，且不会有“泄漏（leak）” ^[3] 。

集萃药康采用基因编辑技术使Rag1基因编码区缺失导致该基因失去活性。经验证，该模型小鼠的T细胞和B细胞发育缺陷。B6-Rag1-KO小

鼠与野生鼠相比，其免疫缺陷表现如下：胸腺、脾脏变小，无成熟T细胞、B细胞，NK细胞比例略增加。

品系策略

应用领域

1、免疫学研究；

2、感染、炎症等研究；

3、肿瘤治疗相关药物筛选。

验证数据

B6-Rag1 KO小鼠病理组织学检测

B6-Rag1-KO小鼠胸腺组织学检测。取小鼠胸腺组织，制作HE染色切片后观察，与野生型小鼠相比，B6-Rag1-KO雄雌小鼠体积减小，被膜下可见少量脂肪细胞浸润，皮质、髓质界限模糊，淋巴细胞减少，间质增多，排列疏松，发育不全。注：绿色箭头所示为脂肪细胞浸润，黑色三角所示为皮质区，黄色五角星所示为髓质区。

B6-Rag1-KO小鼠脾脏组织学检测。取小鼠脾脏组织，制作HE染色切片后观察，与野生型小鼠相比，B6-Rag1-KO雄雌小鼠基本结构消失，无明显髓区、脾小体，围绕中央动脉的细胞基本是未成熟的淋巴细胞，多核巨细胞增多，部分有出血现象。注：黑色三角所示为脾小体，绿色箭头为所示为多核巨细胞。

B6-Rag1-KO小鼠腹股沟淋巴结组织学检测。取小鼠腹股沟淋巴结组织，制作HE染色切片后观察，与野生型小鼠相比，B6-Rag1-KO雄雌小鼠基本结构消失，体积减小，淋巴细胞明显减少，排列疏松，间质增多。 注：黄色五角星所示为淋巴细胞，绿色箭头为所示为间质。

在BALB/c-hPD1/hPDL1小鼠模型皮下接种CT26-hPDL1-mPDL1-KO肿瘤细胞系后测试抗人PD1抗体与抗人PDL1抗体的肿瘤抑制药效

图4 基于BALB/c-hPD1/hPDL1的体内联合用药试验（CT26-hPDL1-mPDL1-KO）。将对数生长期的PDL1人源化的结肠癌细胞CT26-hPDL1-mPDL1-KO接种至6-8周龄的BALB/c-hPD1/hPDL1（PD1与PDL1人源化小鼠）皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为Vehicle（对照）组，Keytruda+Tecentriq联用组（n=8），并使用相应的药物进行治疗。每3天给药1次，共给药6次。

T/B/NK细胞比例检测

B6-Rag1-KO小鼠外周血中T/B/NK细胞比例检测。与野生型小鼠相比，B6-Rag1-KO小鼠外周血中无成熟的T、B细胞，NK细胞代偿性升高。

B6-Rag1-KO小鼠脾脏中T/B/NK细胞比例检测。与野生型小鼠相比，B6-Rag1-KO小鼠脾脏中无成熟的T、B细胞，NK细胞代偿性升高。

B6-Rag1-KO小鼠肝脏中T/B/NK细胞比例检测。与野生型小鼠相比，B6-Rag1-KO小鼠肝脏中无成熟的T、B细胞，NK细胞代偿性升高。

参考文献

1. Oettinger, M.A., et al., RAG-1 and RAG-2, adjacent genes that synergistically activateV(D)J recombination. Science, 1990. 248(4962): p. 1517-23.

2. Mombaerts, P., et al., RAG-1-deficient mice have no mature B and T lymphocytes. Cell,1992. 68(5): p. 869-77.

3. Bassing, C.H., W. Swat, and F.W. Alt, The mechanism and regulation of chromosomal V(D) J recombination. Cell, 2002. 109(2): p. S45-S55