品系名称：NOD/ShiLtJGpt-Prkdc^em26Cd52Il2rg^em26Cd52B2m^em1Cd4/Gpt

品系类型：Knock-out

品系编号：T004670

背景：NOD/ShiLtJGpt

NOD/ShiltJNju遗传背景小鼠具有天然免疫缺陷，如补体系统、巨噬细胞缺陷。Prkdc基因突变会导致VDJ重组受损（scid鼠），造成T细胞和B细胞不能发育成熟，表现为细胞免疫和体液免疫的重度联合免疫缺陷。

Il2 receptor gamma（IL2rγ）链是具有重要免疫功能的细胞因子IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21的共同受体亚基，将编码IL2rγ的IL2rg基因敲除小鼠机体免疫功能严重降低，尤其是NK细胞的活性几乎丧失。通过基因编辑技术在

NOD/ShiLtJNju小鼠上敲除Prkdc及Il2rg基因制作的高度免疫缺陷模型NCG，背景较单一，寿命长，缺乏成熟的T细胞、B细胞和NK细胞，缺乏补体活性。

B2m，又叫Ly-m11、beta2m、beta2-m （beta-2 microglobulin），β2-微球蛋白，是MHC I类蛋白运输到细胞表面的必要成分^[1]。B2m基因敲除的纯合子小鼠细胞表面几乎没有MHC I类蛋白的表达。在CD8+ 毒性T细胞严重缺乏的状态下，某些情况下CD4+ 毒性T细胞会补偿性增加。CD8+ 毒性T细胞严重缺乏的免疫应答反应提供一种途径来评价CD8+T细胞及MHC I类蛋白在多种免疫反应中的作用。B2m基因敲除小鼠还有以下特征：NK细胞缺乏，NK+T细胞缺乏、血清中Ig水平降低。

集萃药康利用基因编辑技术在NCG小鼠上将B2m敲除获得NCG-B2m-KO品系小鼠，该小鼠结合了严重的免疫缺陷突变(scid)、IL2rγ^null和MHC I分子(beta-2微球蛋白)缺乏的特点，并且对移植物抗宿主病(GVHD)有较强的抵抗力，为研究xenogeneic-GvHD的体内机制并评估相应治疗药物提供了可用的小鼠模型。

图1 NCG-B2m-KO小鼠B2m敲除策略示意图

1) 用于制备免疫系统人源化小鼠模型，如接种PBMC或HSC获得的免疫系统人源化小鼠模型；

2) 用于人源细胞组织移植；

3) 接种人源肿瘤用于筛选相关药物；

4) 用于人类造血系统和免疫系统研究；

5）移植物抗宿主病(GVHD)相关研究。

1.MHC I检测

图2 NCG-B2m-KO小鼠MHC I检测

采用H2K抗体检测小鼠MHC I的表达，NCG对照小鼠脾脏细胞中能检测到H2K（占CD45+细胞的比例59.3%），NCG-B2m-KO小鼠脾脏细胞中检测不到H2K的表达。

参考文献

1.Sprent, Jonathan, and Susan R. Webb. "Function and specificity of T cell subsets in the mouse." Advances in immunology. Vol. 41. Academic Press, 1987. 39-133.

2.Brehm, Michael A., et al. "Parameters for establishing humanized mouse models to study human immunity: analysis of human hematopoietic stem cell engraftment in three immunodeficient strains of mice bearing the IL2rγnull mutation." Clinical immunology 135.1 (2010): 84-98.