自然流产(SA)小鼠模型
基本信息
产品名称：
自然流产(SA)小鼠模型
英文名称：
Mouse Model for Spontaneous Abortion (SA)
国产/进口：
国产
产地/品牌：
武汉/云克隆
型号：
DSI638Mu01
参考报价：
销售商：
总点击数：
777
更新日期：
2020-07-20
产品类别：
性能参数
来源
Clark经典反复流产小鼠模型(CBA/J与DBA/2）
模式动物品系
雌性CBA/J，雄性DBA/2，雄性BALB/c小鼠
实验分组
正常妊娠对照组，健康未妊娠对照组，RSA模型组，RSA治疗组
实验周期
6~8 weeks
建模方法
RSA小鼠模型建立
将雌性CBA/J与雄性BALB/c小鼠按2:1比例合笼交配建立正常妊娠小鼠模型，雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠按2:1比例合笼交配建立（复发性流产）RSA小鼠模型，检出阴栓者计为妊娠第0天。
实验共分4组：
治疗组（雌性CBA/J 10只、雄性DBA/25只）
RSA模型组（雌性CBA/J 10只、雄性DBA/25只）
正常妊娠对照组 （雌性CBA/J 10只、雄性BALB/c 5只）
健康未妊娠对照组（雌性CBA/J 10只）
各组从妊娠第0日开始灌胃给药，每组10只雌鼠。
剂量根据成人70kg临床用药剂量按动物体表面积换算，灌胃容积均为0.4mL/20g。正常妊娠组和RSA模型对照组给予相同体积蒸馏水，连续灌胃给药14d，末次给药1h后处死小鼠，取其外周血和蜕膜组织。
应用
可用于研究预防和治疗RSA的药物
模型评价
流式细胞数检测PBMCs中Th17/Treg细胞比例：
分离小鼠PBMCs后，按工作浓度加入佛波酯，Ionomycin，Monensin，37°C孵育4~6h，设同型对照管和检测管。Fc受体阻断剂封闭后，分别加入CD4表面抗体染色，混匀，室温避光孵育15min后每管按操作要求先后加入固定液和破膜/溶血液，洗涤后实验管分别加入2种配色抗体，对照管加入同型对照抗体。避光孵育后，加入洗涤剂离心弃上清，重悬细胞，24h内上机检测。以CD4直方图射门，以散点图染色阳性表示Th17细胞和Treg细胞，用Cellsquest软件获取并分析数据。（一个样本分为两种染色方案，Th17：CD4-FITC、IL-17-PE；Treg：CD4-FITC、CD25-APC、Foxp3-PE）
RT-PCR检测PBMCs中FOXP3、RORrt、STAT3、STAT5的表达：
分别提取各组PBMCs总RNA，并进行RNA纯度和完整性鉴定；设计引物，逆转录成cDNA，以β-actin为内参，然后进行实时荧光定量RT-PCR；采用相对定量法利用Ct计算FOXP3、RORrt、STAT3、STAT5 mRNA的相对量。
组织病理学
1.HE染色观察局部组织细胞病理结构改变：
取各组小鼠蜕膜组织，包埋石蜡切片，HE染色。
2.电镜观察局部组织细胞凋亡和病理结构改变：
无菌取各组小鼠蜕膜组织，加入2.5%戊二醛进行预固定，1%锇酸进行后固定，再逐级用乙醇和丙酮进行脱水，树脂包埋，制备成超薄切片，醋酸双氧铀-硝酸铅溶液进行双重染色，置投射电镜下进行观察。
3.免疫组化分析局部组织细胞因子STAT3、STAT5表达：
4.RT-PCR检测蜕膜组织中的FOXP3、RORrt、STAT3、STAT5 mRNA表达。
5.Western blot检测蜕膜组织中的STAT3、STAT5蛋白表达
标志因子水平
6.1ELISA检测脱膜组织匀浆中的IL-2、IL-6。
收集各组蜕膜组织，组织匀浆后取上清进行ELISA检测。
6.2ELISA检测细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β1表达：
取各小鼠血清，使用IL-2、IL-6和TGF-β1 ELISA kit，按照试剂盒说明书进行操作，在酶标仪上设定标准曲线，每个标本和标准品均设3个复孔。用酶标仪读取血清样本的吸光度值（A），通过标准曲线计算样本浓度值。
统计学分析
应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显
公司简介
武汉云克隆科技股份有限公司下设配套进出口企业武汉优尔生商贸有限公司，负责国内市场销售及进口报关，国内原料采购及出口退税。 面对内需市场销售的生命科学研究用产品有检测试剂、分析仪器和动物模型。可以提供约11,000种蛋白、19,000种抗体以及7,000种检测试剂盒。其中蛋白产品包括天然蛋白、重组蛋白、合成多肽和小分子偶联蛋白。抗体产品包括单克隆抗体与多克隆抗体，部分抗体采用HRP、FITC或生物素标记成为标记抗体。检测试剂盒主要包括ELISA试剂盒和CLIA试剂盒。分析仪器主要包括智能微孔板清洗机（洗板机）、智能微孔板读数仪（酶标仪）、智能化学发光分析仪、智能电热二氧化碳恒温培养箱、智能梯度PCR系统等。疾病模型涉及各种人类疾病动物模型、肿瘤移植动物模型和转基因动物模型以及数百种原代细胞。 武汉云克隆科技股份公司位于武汉出口加工区，是以分子生物学与免疫学研究和实验发展为主的高新技术企业集团。作为检测试剂与分析仪器原始设计制造商以及动物实验合同研究组织，为CLOUD-CLONE、ABCAM、LSB、MBS、USB等美欧企业代工检测试剂制备、分析仪器制造和动物实验服务。
售后服务
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