分子生物学试剂

3173 DNA聚合酶

基本信息
产品名称:
3173 DNA聚合酶
英文名称:
3173 DNA Polymerase
国产/进口:
国产
产地/品牌:
百奥莱博
型号:
MT3173
参考报价:
总点击数:
514
更新日期:
2025-05-14
产品类别:

性能参数

特别提示:包括3173 DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:3173 DNA聚合酶
英文名称:3173 DNA Polymerase
产品货号:MT3173
产品规格:250U|2500U

3173 DNA聚合酶为来源于病毒的热稳定型DNA聚合酶,通过点突变修饰,使其3’-5’外切活性缺失(exo-形式)而获得更佳的扩增活性。该酶除了具有依赖于DNA的聚合酶活性,还具有依赖于RNA的逆转录活性,因此可用于单管RT-PCR扩增。该酶具有强烈的链置换活性,可用于DNA或RNA的等温扩增。在以RNA为模板的LAMP实验中,可实现单酶系统反应。对于有复杂二级结构的RNA模板,可通过92℃加热3s来得到好的扩增效果,而Bst pol在此温度加热后导致扩增活性丧失。

3173 DNA聚合酶在95℃条件下的半衰期为20min,因此PCR的起始预变性时间通常为1~2min。该酶搭配两种Buffer:10×3173 Isothermal Buffer和5×Best PCR Buffer。10×3173 Isothermal Buffer用于恒温PCR扩增,其反应温度不能超过70℃。5×Best PCR Buffer用于常规PCR扩增,94℃预变性时间不可超过5min。

产品特点:
 
  • 同时具有较强的延伸能力和逆转录活性;
  • 耐热性能极强,对于复杂模板的扩增活性强;
  • 强烈的链置换活性,可应用于LAMP检测。


产品应用:
 
  • 恒温PCR扩增;
  • LAMP和RT-LAMP;
  • 链置换基因合成;
  • 在60-70℃之间具有反转录活性,可用于单管RT-PCR。


产品组成:
 
组分 250U 2500U
3173 DNA Polymerase (5U/μl) 50μl 500μl
10×3173 Isothermal Buffer 1ml 5ml
5×Best PCR Buffer 1ml 5ml

储存:-20℃可保存3年。

单位定义:
一个活力单位即在65℃条件下,30分钟内催化25nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

使用方法:

一、以DNA为模板进行PCR扩增
 
  • 50μl反应体系配制:
     
    成分 用量
    3173 DNA Polymerase (5U/μl) 1μl
    5×Best PCR Buffer 10μl
    dNTP Mixture (2.5mM each) 4μl
    模板DNA 1ng~1μg
    上游引物(10μM) 5μl
    下游引物(10μM) 5μl
    ddH2O Up to 50μl
  • PCR扩增循环参数:
     
    循环数 温度 时间
    1st Cycle 90℃ 2min
    25-40 Cycles 90℃ 15s
    Tm 15s
    72℃ 1kb/1min
    Last Cycle 72℃ 5min

     


二、以RNA为模板进行RT-PCR扩增
 
  • 50μl反应体系配制:
     
    成分 用量
    3173 DNA Polymerase (5U/μl) 1μl
    5×Best PCR Buffer 25μl
    dNTP Mixture (10mM each) 5μl
    模板RNA 10ng~1μg
    上游引物(10μM) 2μl
    下游引物(10μM) 2μl
    ddH2O Up to 50μl
  • PCR扩增循环参数:
     
    循环数 温度 时间
    1st Cycle 60℃ 60min
    35 Cycles 90℃ 15s
    57℃ 15s
    72℃ 1kb/1min
    Last Cycle 72℃ 5min

     


三、缺刻恒温PCR扩增

 
  • 50μl反应体系配制:
     
    成分 用量
    3173 DNA Polymerase (5U/μl) 1μl
    10×3173 Isothermal Buffer 5μl
    dNTP Mixture (10mM each) 5μl
    模板DNA 10ng~1μg
    引物(500μM) 5μl
    ddH2O Up to 50μl
  • 扩增程序:
    55℃孵育2~8h。

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    货号:SV0027
    规格:1,500U|300U|150U
    在不同反应缓冲液的活性:
    BalbBuffer 1.1: 100%
    BalbBuffer 2.1: 75%
    BalbBuffer 3.1: 25%
    CutSmart Buffer: 75%
    特性:
    重组酶。
    反应条件:
    BalbBuffer 1.1,37℃。
    热失活:65℃ 20 分钟。
    浓度:
    5,000units/ml。
    甲基化敏感性:
    对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
    注意事项:
    延时酶切条件下可能出现星号活性。

    名称:BsrI限制性内切酶
    货号:SV0233
    规格:5KU|1KU|500U
    在不同反应缓冲液的活性
    BalbBuffer 1.1: <10%
    BalbBuffer 2.1: 50%
    BalbBuffer 3.1: 100%
    CutSmart Buffer: 10%
    特性
    省时酶。
    反应条件
    BalbBuffer 3.1,65℃。
    热失活:80℃ 20 分钟。
    浓度
    10,000units/ml
    37℃ 时活性
    20%。
    甲基化敏感性
    对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

    名称:ClaI限制性内切酶
    货号:SV0289
    规格:5KU|1KU|500U
    在不同反应缓冲液的活性:
    BalbBuffer 1.1: 10%
    BalbBuffer 2.1: 50%
    BalbBuffer 3.1: 50%
    CutSmart Buffer: 100%
    特性:
    CutSmart、重组酶、省时酶。
    反应条件:
    CutSmart 缓冲液,37℃。
    热失活:65℃ 20 分钟。
    浓度:
    10,000units/ml。
    甲基化敏感性:
    对dam和哺乳动物CpG甲基化敏感。
    注意事项:
    Clal是BspDl的完全同裂酶。
公司简介
北京百奥莱博科技有限公司一家专注于生命科学研究领域的生物技术公司,坚持“质量至上,服务为本,全心全意助力生命科学”的理念,为广大用于提供稳定、可靠、专业的产品和服务支持,产品线包括分子生物学,细胞生物学,免疫检测,抗体,重组蛋白,血液制品等系列。“忙忙碌碌的平凡,铸就事业的不凡”。让我们携起手来,共同创造生命科学的蓬勃发展。

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