pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒--性能参数，报价/价格，图片

基本信息

产品名称：

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒

英文名称：

pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab

国产/进口：

国产

产地/品牌：

百奥莱博

型号：

YTB3025

参考报价：

销售商：

北京百奥莱博科技有限公司

总点击数：

2018

更新日期：

2025-07-31

产品类别：

分子生物学试剂

性能参数

特别提示：包括pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒
英文名称：pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab
产品货号：YTB3025
产品规格：1μg|100μg

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒所克隆的ORF1ab(168bp)含有中国疾控中心所公布的SARS-CoV-2冠状病毒基因组中开放读码框ORF1ab(open reading frame 1ab，ORF1ab)荧光检测RT-PCR特异性引物(1ab-F:5"-CCCTGTGGGTTTTACACTTAA-3"；1ab-R:5"-ACGATTGTGCATCAGCTGA-3"，该对引物扩增产生119bp片段)扩增所包含区域，该克隆适用于SARS-CoV-2的特异性检测。

SARS-CoV-2 ORF1大约占整个基因组长度的三分之二，位于病毒基因组5"端，编码病毒复制酶，包括ORF1a和ORF1b。ORF1a和ORF1b分别编码两个多聚蛋白(poly-protein)即pp1a和pp1ab，多聚蛋白产生后，被病毒编码的类胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin-like protease，3CLpro)或1-2个类木瓜蛋白酶(papain-like protease，PLP)水解为具有独立生物学功能的十六个非结构蛋白(NSP1-NSP16)，其中ORF1a编码NSP1-NSP11，而ORF1b编码NSP12-16。

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
M13/pUC Forward Primer	378-395
ORF1ab	405-572
Multiple cloning site	573-594
M13/pUC Reverse Primer	608-625
Lac operator	633-649
Lac Promoter	657-687
ColE1 origin of replication(Ori)	1011-1599
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	1770-2630

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒(2830bp)的图谱如下：

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒的多克隆位点的详细图谱如下：

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒中没有的酶切位点包括：

AccI	AfeI	AflII	AgeI	AleI	ApaI	AscI
AsiSI	AvrII	BaeI	BbsI	BbvCI	BfuAI	BglII
BlpI	BmgBI	BmtI	Bpu10I	BsaAI	BsaBI	BseRI
BsgI	BsiWI	BsmFI	BsmI	BspDI	BspEI	BspMI
BsrGI	BssHII	BstBI	BstEII	BstXI	BstZ17I	Bsu36I
BtgI	BtgZI	ClaI	CspCI	DraIII	EagI	EcoNI
EcoRV	FseI	HincII	HpaI	MfeI	MluI	MscI
NaeI	NcoI	NgoMIV	NheI	NotI	NruI	NsiI
PacI	PaeR7I	PflFI	PflMI	PmeI	PmlI	PpuMI
PshAI	PsiI	PspOMI	PspXI	PstI	RsrII	SacII
SalI	SbfI	SexAI	SfiI	SgrAI	SnaBI	SpeI
SphI	SrfI	StuI	StyI	SwaI	Tth111I	XbaI
XcmI	XhoI

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒中的单酶切位点包括：

AatII	G,ACGT`C	966	EcoO109I	RG`GNC,CY	2571
Acc65I	G`GTAC,C	660	EcoRI	G`AATT,C	1324
AflIII	A`CRYG,T	664	HindIII	A`AGCT,T	1460
AhdI	GACNN,NN`NGTC	999	KasI	G`GCGC,C	2654
AlwNI	CAG,NNN`CTG	4176	KpnI	G,GTAC`C	2572
ApoI	R`AATT,Y	977	NarI	GG`CG,CC	240
AvaI	C`YCGR,G	935	NdeI	CA`TA,TG	597
BamHI	G`GATC,C	1231	NmeAIII	GCCGAG(N)19,NN`	977
BanII	G,RGCYC	971	PciI	A`CATG,T	4490
BcgI	,NN`(N)₁₀CGA(N)₆TGC(N)₁₀,NN`	601	PluTI	G,GCGC`C	2690
BclI	T`GATC,A	3561	SacI	G,AGCT`C	2575
BpmI	CTGGAG(N)14,NN`	1624	SapI	GCTCTTCN`NNN,	995
BsaI	GGTCTCN`NNNN,	2390	ScaI	AGT\|ACT	951
BsaXI	,NNN`(N)₉AC(N)₅CTCC(N)₇,NNN`	977	SfoI	GGC\|GCC	1077
BseYI	C`CCAG,C	2412	SmaI	CCC\|GGG	3088
BsoBI	C`YCGR,G	2805	SspI	AAT\|ATT	655
BspQI	GCTCTTCN`NNN,	3254	TspMI	C`CCGG,G	965
BsrFI	R`CCGG,Y	1413	XmaI	C`CCGG,G	2347
BstAPI	GCAN,NNN`NTGC	2412	XmnI	GAANN\|NNTTC	2573
Eco53kI	GAG\|CTC	382	ZraI	GAC\|GTC	346

pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
M13 fwd(378-395):5"- TGTAAAACGACGG CCAGT -3"
M13 rev (608-625):5"- CAGGAAACAGCTATGACC -3"

使用说明：

首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切。

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规格：1mL
本产品是胚胎培养过程中分离单个胚胎细胞的裂解液。可用于分离得到不同时期的胚胎的单细胞，得到的单细胞可用于各种单细胞分析，核酸提取等实验。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

名称：大肠杆菌HB101化学感受态细胞
货号：BTN81221
规格：0.1mL*10
HB101菌株是E.coli K12菌株与E.coli B菌株的杂合产物(同时也是Stbl3的原始菌株)。recA13突变可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。hsdS20 背景使HB101缺失内切酶系统，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。本产品是采用大肠杆菌HB101特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。

产品特点：
1. 具有链霉素抗性。
2.基因型：F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-)recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((strR)glnV44λ-。
3. 不存在 lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。
4. 该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟，晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入450μL 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃倒置培养12-16小时。

注意事项：
1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(5000rpm，1分钟)收菌后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
3. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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