动物试剂

SURE 感受态细胞

基本信息
产品名称:
SURE 感受态细胞
英文名称:
URE Chemically Competent Cell
国产/进口:
国产
产地/品牌:
雅吉生物
型号:
11-1191
参考报价:
总点击数:
437
更新日期:
2025-05-14
产品类别:

性能参数
介绍: 基 因 型E.coli B e14-(McrA-) Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171 endA1 gyrA96 thi-1 supE44 relA1 lac recB recJ sbcC umuC::Tn5 (Kanr) uvrC [F´ proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr)].简 要 说 明真核生物DNA存在较多“十字型”、“Z字型”等二级或三级结构,这种DNA结构在利用传统大肠杆菌进行克隆时易被大肠杆菌体内的重组酶系统或其他防御系统识别并对其进行重组,删除等破坏,导致很难对这类DNA进行正确的克隆操作。SURE菌株可以解决这些问题:此菌株体内重组酶系统整条通路被破坏,并且(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-) 这些限制性突变的存在赋予此菌株无法对外源DNA进行标记、限制的能力,提高了外源甲基化DNA的克隆效率,同时具有核酸酶(endA)突变、重组酶 (recB recJ)突变,增强了外源DNA的稳定性。存在于F´因子上的lacIqZΔM15基因使此菌株可以进行蓝白斑筛选;Kanr,Tetr赋予菌株卡那霉素和四环素抗性。High5TM系列SURE感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达5×108cfu/μg。操 作 说 明1.SURE感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。注 意 事 项1.感受态细胞最好在冰上融化。2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。3.操作过程中勿将感受态暴露于氧化性环境中,例如超净台应将臭氧排净后再使用。4.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。5.此菌株具有卡那霉素,四环素抗性,拥有这两种抗性的质粒无法使用;对<40 µg/ml氯霉素有抗性,但对100 µg/ml氯霉素敏感。使用其他抗生素参考浓度:氨苄青霉素(终浓度: 100 µg/ml),氯霉素(终浓度:100 µg/ml)。6.High5TM系列SURE感受态细胞采用常规转化方法,转化效率可达5×108cfu/μg。 ;如果有更高要求,可尝试Stratagene公司推荐的标准protocol。Stratagene standard protocol1.Pre-chill a 14-ml BD Falcon polypropylene round-bottom tubes on ice. Preheat NZY+ broth to 42℃.2.Thaw the cells on ice. When thawed, gently mix and aliquot 100 µl of cells into the pre-chilled tubes.3.Add 4 µl of the β-ME(β巯基乙醇)  to the aliquot of cells.4.Swirl the tubes gently. Incubate the cells on ice for 10 minutes, swirling gently every 2 minutes.5.Add 0.1-50 ng of the experimental DNA (or 2 µl of a ligation mixture) to the aliquot of cells.6.Swirl the tubes gently, then incubate the tubes on ice for 30 minutes.7.Heat-pulse the tubes in a 42℃ water bath for 30 seconds. The duration of the heat pulse is critical.8.Incubate the tubes on ice for 2 minutes.9.Add 0.9 ml of preheated (42℃) NZY+ broth and incubate the tubes at 37℃ for 1 hour with shaking at 225-250 rpm.10.Plate ≤200 µl of the transformation mixture on LB agar plates containing the appropriate antibiotic (and containing IPTG and X-gal if color screening is desired).11.Incubate the plates at 37℃ overnight. If performing blue-white color screening, incubate the plates at 37℃ for at least 17 hours to allow color development (color can be enhanced by subsequent incubation of the plates for 2 hours at 4℃).
公司简介
       上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学,通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户的厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉,为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到,公司总投资超过2000万元,并先后引进了自动化设备,组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统,为生产高质量的产品提供了有效保证。
     雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员的好评,先后在权威杂志文章中被引用。
 
上海雅吉生物科技有限公司以极强的职业精神,积极、负责、坦诚的服务令我们的客户满意! 
客户服务承诺
    以“服务、客户、技术”为根本。客户是我们的核心,坚持以高质量的产品服务客户, 秉持诚信原则,重视客户的意见与感受;我们愿意为大家提供良好的售后服务。希望老师们对我们的服务及工作提出意见,您的满意是我们工作的动力,祝广大师生客户生活工作愉快!
更多产品详情可查询官网:www.yajimall.com

售后服务
试剂盒售后:本公司出售的试剂盒均保质保量,质量问题均可免费退换,另提供免费代测服务。 细胞售后: 1. 细胞运输丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 3. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,未告知的视为产品合格。4-10天内出现问题,请提供细胞照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟我公司人员及时沟通判定是否重发,具体可以参照我官网或者随货说明书相关售后条款。
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