DH10B 电击感受态细胞--性能参数，报价/价格，图片

基本信息

产品名称：

DH10B 电击感受态细胞

英文名称：

DH10B Electroporation-Competent Cell

国产/进口：

国产

产地/品牌：

雅吉生物

型号：

11-1194

参考报价：

销售商：

上海雅吉生物科技有限公司

总点击数：

497

更新日期：

2025-06-03

产品类别：

动物试剂

性能参数

介绍：基因型:F- mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC) 80lacZM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara, leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG简要说明High5TM系列DH10B感受态细胞只能用于电击转化而不能用于热激转化。DH10B菌株来源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA ，无论真核生物还是原核生物的基因组DNA都能被高效的转入DH10B中。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80dlacZ∆M15标记的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选，rpsL赋予其链霉素抗性。High5TM系列DH10B感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种文库构建。High5TM系列DH10B感受态细胞经特殊工艺制作，经 pUC19质粒检测，转化效率>1010cfu/μg。操作说明1. 0.1cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。2. 取-80℃保存的High5TM 系列DH10B感受态细胞放入冰浴中融化，加入1 μl目的DNA (质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀立即插入冰中。A. 测定转化效率使用1 μl 10 pg/μl的对照质粒pUC19；B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后适量TE缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬，保证DNA浓度不超过100 ng/μl。3. 用200 μl枪头将感受态-质粒混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=2.4 kV (此为BioRad 电转仪推荐参数，使用者也可按所用电转仪推荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。5. 立即向电击杯中加入1ml不含抗生素的无菌培养基 S.O.C.，混匀后转移到空50ml管中，并用1ml SOC轻柔冲洗电转杯并转移到50ml管中，另补加3ml SOC培养基， 37℃，200 rpm复苏60分钟。6. 5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200 μl涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少13h。注意事项1.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10。2.当质粒不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。3.若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。4.对于连接产物转化，最好转化前用乙醇沉淀DNA后适量TE缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加打火的风险。5.混入质粒时应轻柔操作。6.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

储存条件： -80℃

用途：克隆感受态细胞

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公司简介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科学领域，科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学，通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度，深得新老客户的厚爱，本着“优质、服务、信誉”的精神，坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉，为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门联动服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到，公司总投资超过2000万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。
雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员的好评，先后在权威杂志文章中被引用。
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