茜素红S是一种蒽醌类衍生物，能和多种金属离子螯合生成稳定的橙红色或深红色的复合物，是一种良好的金属指示剂，也可作为吸光度法测定金属离子的显色剂，还可作为酸碱指示剂，或用于极谱法测定金属离子。

针对不同样品特点，全新推出一系列茜素红S染色液产品，利用染色液酸碱性和浓度的区别，可以分别对细胞外基质钙质沉积、细胞内钙质沉积和成骨细胞矿化结节钙质进行染色，方便您根据实际需求进行选购。
染色原理：
茜素红S可与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物，常用于染色或定位组织中的钙质沉积。其中酸性染色液适用于骨、软骨等细胞外基质钙质沉积染色；细胞内钙质沉积量比较少，酸性染色液可能会使钙质溶解，导致染色效果差甚至假阴性，因此一般采用碱性染色液，同时碱性染色液可以增加染色时间，从而获得比较满意的染色效果。

染色效果：

图1. 茜素红S染色液(2%, pH4.2)用于小鼠尾椎骨石蜡切片的染色效果图。如图所示，钙盐沉积处显橙红色。注：实际染色效果会因样品及实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图2. 茜素红S染色液(0.2%, pH8.3)用于MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞)细胞诱导分化后的染色效果图。如图所示，钙盐沉积处显紫红色。注：实际染色效果会因样品及实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

图3. 成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S法)用于MC3T3-E1细胞诱导分化后的染色效果图。如图所示，经本试剂盒染色后，MC3T3-E1细胞矿化结节钙盐沉积处显橙红色。实际染色效果会因样品及实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。
 

成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S法) (Alizarin Red S Staining Kit for Osteogenesis)，也称成骨检测试剂盒(Osteogenesis Assay Kit)，是一种基于茜素红S螯合钙离子(Ca²⁺)生成橙红色复合物，以检测成骨细胞矿化结节的染色试剂盒。

人体和动物的骨组织在生命过程中不断地进行着重建，骨重建过程包括骨的分解吸收与新骨的形成。破骨细胞(osteoclasts)负责骨分解与吸收，而成骨细胞(osteoblasts, OB)是骨形成的主要功能细胞，负责新骨形成。在成骨分化过程中，其基本的生物学特征是骨基质合成、分泌、矿化及成熟。成骨细胞首先合成I型胶原(collagen-I, COL-I)、骨钙素(osteocalcin, OC)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)等胞外基质，并通过基质小泡释放钙离子和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)等酶类物质，钙离子在碱性磷酸酶作用下沉淀在胶原纤维丝上，完成基质矿化过程，最终形成骨组织。I型胶原从增殖期开始表达，基质合成期达巅峰；碱性磷酸酶是成骨细胞分化的早期标志物，骨基质合成期开始出现，矿化期达巅峰；骨钙素是成骨细胞分化成熟的标志，一般矿化早期开始表达，矿化结节成熟后达巅峰。矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志，同时也是成骨细胞行使成骨功能的主要形态学特征，观察成骨细胞的矿化结节是研究成骨细胞分化的常用技术方法之一。

茜素红S染色是一种常用的染色方法，广泛用于成骨细胞分化、骨细胞或组织病理生理的研究。茜素红S (Alizarin Red S, 简称ARS)，别名茜素磺酸钠、茜素胭脂红，CAS号为130-22-3，分子式为C₁₄H₇NaO₇S，分子量为342.25。茜素红S是一种蒽醌类衍生物，能和多种金属离子螯合生成稳定的橙红色或深红色的复合物，是一种良好的金属指示剂，也可作为吸光度法测定金属离子的显色剂，还可作为酸碱指示剂，或用于极谱法测定金属离子。在组织学和组织病理学中，由于茜素红S可与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物，而常用于染色或定位组织中的钙质沉积。

本试剂盒中茜素红S染色液的茜素红S浓度经过优化，呈酸性，可以通过螯合成骨细胞矿化结节中的钙离子，以判断成骨细胞的分化情况。针对不同样品的特点，研发了三种茜素红S染色液，具体请参考下表选择合适的染色液。

本产品用于MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞)诱导分化的染色效果参考图1。

图1. 成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S法)用于MC3T3-E1细胞诱导分化后的染色效果图。如图所示，经本试剂盒染色后，MC3T3-E1细胞矿化结节钙盐沉积处显橙红色。实际染色效果会因样品及实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

按照6孔板每孔使用1ml固定液和1ml茜素红S染色液来计算，C0148S可以检测50个样品。
室温避光保存，至少一年有效。保存条件：

注意事项：

首次使用固定液时，须特别注意加入40ml无水乙醇并混匀。由于固定液易挥发，使用完毕后请立即旋紧瓶盖。

茜素红S染色液的染色的最佳时间与样品钙离子的含量有关，一般情况下染色时间为30分钟，可根据实际染色效果酌情增加或减少染色时间。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1.试剂盒的准备：
首次使用时，请在固定液中加入40ml的无水乙醇，并充分混匀后备用。固定液加入无水乙醇配制完毕后，室温避光保存，至少一年有效。
2.样品处理。
a.细胞诱导分化之后，去除培养液，用PBS (C0221A)洗涤1次。
b.固定液固定20分钟。
c.PBS洗涤3次。
3.茜素红S染色液染色。
a.加入适量茜素红S染色液，均匀覆盖细胞即可，室温染色30分钟。注：请根据实际染色效果调整染色时间。
b.蒸馏水充分洗涤，随后即可在显微镜下观察和拍照。