分子生物学试剂

pClone007 Versatile Simple Vector Kit

基本信息
产品名称:
pClone007 Versatile Simple Vector Kit
英文名称:
pClone007 Versatile Simple Vector Kit
国产/进口:
国产
产地/品牌:
擎科生物
型号:
TSV-007VS
参考报价:
1180元/60次
总点击数:
4295
更新日期:
2024-03-28
产品类别:

性能参数
pClone007 Versatile Simple Vector Kit
通用型TOPO载体,平粘末端均可使用;5×mix,高阳性率
 

【产品简介】
本产品利用拓扑异构酶Ⅰ(Vaccinia topoisomerase Ⅰ )瞬间完成连接反应的优良特性,配以本公司独特的载体制备工艺,完美解决传统TA克隆时间长,效率低,对末端有要求等各种缺陷,实现克隆技术的革命飞跃。本产品是5×Mix,使用时只需加插入片段和水。
【产品特点】
1-5分钟快速连接
阳性率高
无需蓝白斑筛选
平、黏末端均适用
无多克隆位点,连接300 bp以下的小片段可避免测序中断

【产品组成及保存】
-25~15℃保存18个月,避免反复冻融。
  007VSm(10 次) 007VS(60 次)
5×pClone007 Versatile Simple Vector Mix 20 µL 3× 40 µL
Control Template(50 ng/µL)* 10 µL 10 µL
pUC19(10 pg/µL)** 10 µL 10 µL

*阳性对照片段,用于检测目的产物的质量,大小为1 kb
**阳性对照质粒,用于检测感受态细胞的质量,为Amp抗性

【操作流程】
 
插入片段大小 bp 最佳用量 ng
300~1000 10~50
1000~2000 50~100
2000~3000 100~200

【问题讨论】
Q1:使用擎科007系列载体,连接产物可以保存吗?
A1: 为了保证高效的连接效率,我们建议即时连接转化。如果已经完成连接反应但不能马上进行转化实验,建议将连接产物置于4℃保存,保存时间不超过2 h,转化前需在室温(22℃-30℃)反应1-5 min。(实验请使用无菌PCR管,若使用非无菌PCR管进行连接,管中微生物可能会降解连接产物导致连接失败)。

Q2:使用擎科007系列T载体,对感受态细胞有什么要求?
A2:转化时请使用高效的感受态细胞(转化效率≥1×108 cfu/µg pUC19),会得到更理想的阳性克隆。注意不能使用耐受自杀基因的感受态细胞进行转化,推荐使用擎科TSC-C01,转化效率高达1×1010 cfu/µg(TSC-C01)。

【实例分享】
使用TSV--007VS连接2 kb PCR扩增产物后转化Trelief ™ 5α Chemically Competent Cell。菌落PCR鉴定阳性率16/16,阳性菌落测序正确率100%
公司简介

北京擎科生物科技股份有限公司(Beijing Tsingke Biotech Co., Ltd.)是一家自主全产业链的基因合成平台型企业,业务范围涵盖合成基因组学产品及服务、生命科学原料及设备、生物制造CXO三大方向。

企业总部位于北京,运营实体和实验室遍布全国,总运营面积超70,000 m²。致力于为全球从事生命科学研究的科研人员及企事业单位提供高质量的生物技术服务和产品,业务覆盖全国并延伸至美洲、欧洲等海外地区,拥有快速响应客户需求的能力,为全球近20万用户提供服务与产品。

[使命]生物科技 · 让世界更美好
[愿景]世界伟大的基因工厂
[核心价值观]品质 创新 奋斗 共赢


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