MMLV(RNase H-)逆转录酶--性能参数，报价/价格，图片

基本信息

产品名称：

MMLV(RNase H-)逆转录酶

英文名称：

MMLV (RNase H-)Reverse Transcriptase

国产/进口：

国产

产地/品牌：

雅吉生物

型号：

Z60905

参考报价：

销售商：

上海雅吉生物科技有限公司

总点击数：

570

更新日期：

2025-05-14

产品类别：

生化试剂

性能参数

MMLV(RNase H-)逆转录酶是突变型的 MMLV 逆转录 DNA 聚合酶，从表达 Moloney Murine Leukemia Virus （莫洛尼氏鼠白血病病毒）reverse transcriptase 基因(pol 基因)的 E.coli 细胞中分离纯化而得，由一个分子量为 76.1 KDa 的单亚基组成，可催化以单链 DNA、RNA 或 DNA：RNA 杂交链为模板的互补 DNA 链的聚合反应。跟野生型相比,它没有 RNase H 活性。

1. 延伸性能好，可合成长达 12.5 Kb 的全长 cDNA。
2. 最佳反应温度为 42℃，但在 50℃时仍有活性，70℃10 分钟能使其失活。
3. 能以 Cy3-，Cy5-，rhodamine-， aminoallyl-，fluorescein 等标记的nucleotides 为底物。
4. 可用于 first strand cDNA 合成，second strand cDNA 合成，DNA labeling，RNA primer extension 等。
5. 与 PCR 兼容，RT 产物可以用于 PCR 和 Real-time PCR。
6. 能被金属螯合剂，无机磷酸，焦磷酸和多胺抑制。
没有 RNase H 活性。

成份	编号	塑料袋包装
MMLV 逆转录酶，200U/μL	60905a	50 μL（绿盖）
5×RT Buffer	60905b	1 mL（本色盖）
使用手册	60905sc	1 份

运输及保存	低温运输，-20℃保存，有限期一年
使用方法	一：合成 PCR 用的 1st-strand cDNA 1. 按下表配制 RT 反应体系:
		成分	加入量
		自备 RNA 模板
		总 RNA	100-500 ng
		或 poly(A) mRNA	10-500 ng
		或专一的 RNA	0.01pg-500ng
		注意：RNA 样品不能有基因组 DNA 污染。
		自备引物
		Oligo (dT)18(0.5ug/μL)	1 μL
		或随机引物(0.2ug/μL)	1 μL
		或 RNA 模板专一性引物	15-20pmol

注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟最后得到的
cDNA 的平均长度成反比。

自备 RNase-free 水

补水到 12 μL

2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再严格按下表顺序加入各成分：
5×RT Buffer 4 μL
自备 RNase Inhibitor (20U/μL) 1  μL自备 dNTP (10 mM each)2 μL
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成
45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃（5
分钟）。
5. 加入 1  μL (=200 U) MMLV 逆转录酶，反应终体积为 20μL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，不需要纯化。
二：合成建文库用的 1st-strand cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系:

2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。

3. 严格按下表顺序加入各成分：
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成
45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃（5
分钟）。
5. 加入 1  μL (=200 U) MMLV 逆转录酶，反应终体积为 20μL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以

用于第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃。
储存 Buffer：50 mM Tris-HCl (pH 8.3)，0.1 M NaCl，1 mM EDTA，5 mM DTT，0.1% (v/v) Triton X-100 和 50% (v/v) glycerol 。
反应 Buffer，5X：250 mM Tris-HCl (pH 8.3 at 25℃)，250 mM KCl， 20 mM MgCl2，50 mM DTT。
活性定义
以 poly(rA)为模板，以 oligo(dT)12-18 为引物，在 37℃温度下，在 10 分钟将
1 nmol 的 dTMP 掺入到多核苷酸中所需酶量为一个单位。酶反应条件为: 50 mM Tris-HCl (pH 8.3)，6 mM MgCl2，10 mM DTT，40 mM KCl，

0.5 mM dTTP，0.4 MBq/mL [3H]-dTTP，0.4 mM polyA•oligo(dT)12-18 。纯度

图注: 10 μL 本产品在SDS-PAGE 中电
泳后染色照片。纯度》99%。M 表示蛋白质分子量对照。

公司简介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科学领域，科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学，通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度，深得新老客户的厚爱，本着“优质、服务、信誉”的精神，坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉，为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门联动服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到，公司总投资超过2000万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。
雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员的好评，先后在权威杂志文章中被引用。
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