【正文】
Murex人类免疫缺陷病毒抗体（HIV 1+2）及抗原（HIV1 P24）联合检测试剂盒（酶联免疫法）
用途
本品用于人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1及HIV-1型O群)、HIV-2型抗体及HIV1 P24抗原的检测。
摘要和试验说明
两种的人类免疫缺陷病毒HIV-1，HIV-2是引起获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的病原体，这两种逆转录病毒是通过接触受感染的体液传播的，主要通过血液、生殖器分泌物和母婴传播。据报道HIV-1的感染遍及全球，而HIV-2的感染主要发生在西非和一些欧洲国家。
这两种病毒的gag蛋白和pol蛋白有很强的抗原交叉反应，但其膜（区）的糖蛋白却很少有交叉反应。
如果用于筛查，就需要用这两种病毒的膜蛋白表位及具有交叉反应的(核心区)gag或pol蛋白作抗原，以确保能检测出这两种病毒不同感染阶段的抗体。HIV-1变种均归为HIV-1 O亚型，是在科麦隆和欧洲的病人样品中检测出来。O亚型和最初己知的HIV-1(均归为M群)型有很大差别。因根据交叉反应来识别亚型并不令人满意，故可用此病毒膜区的特异性抗原位点来检测感染个体的O亚型抗体。感染HIV后，最早出现的特异性抗体是IgM，随后才出现IgG。通过检测IgM和IgG可以最灵敏地检测出抗-HIV阳转血清，而HIV核心蛋白在抗体阳转前的就能检测出来。
Murex HIV抗原／抗体试剂盒用来检测HIV-1和HIV-2(的外膜)有反应性的HIV核心抗原，以及膜区糖蛋白的IgG、IgM和IgA抗体、HIV—1和HIV—2有交叉反应pol蛋白，因此，可用于对潜在感染的血清、EDTA血浆或柠檬酸血浆的检测。
操作原理
Murex HIV抗原／抗体联检试剂盒是用HIV-1(O)免疫决定簇的合成多肽、重组的HIV—1pol蛋白和HIV-1，HIV-2膜(区)蛋白及抗HIV-1 p24单克隆抗体包被微孔板，用辣根过氧化酶标记的相同抗原和抗p24的其他单克隆抗体的混合物为酶结合物。
被检样品或对照血清在微孔板中孵育，样品或对照血清中的HIV核心区抗原和／或HIV抗体与包被板上的抗体和／或抗原结合，洗去多余部分。然后加入酶结合物，与已结合到孔上的HIV核心抗原和／或抗体结合，如样品中没有核心抗原和／或特异性抗体，酶结合物就不能结合到孔上。
洗去未结合的酶结合物后，孔中加入3，3"，5，5"-四甲基联苯胺(TMB)和过氧化氢溶液，结合有酶结合物的孔呈现蓝绿色，当加入硫酸终止反应后而呈橙色，可通过酶标仪在450nm波长下读数。
试剂
试剂描述、制备和建议的保存条件
亦见警告和注意事项
除非特别说明，所有组分都必须在2-8℃保存。在此条件下，直到效期试剂都能保持其良好的活性。
1．包被板
1块(GE41/7G79-01)或5块(GE42/7G79-02)包被HIV抗原和单克隆抗体的96孔板。
使用前，应先将反应板放置室温后，再取出所用板条。
未使用的板条的放入密封袋中2—8℃保存。
2．样品稀释液
1瓶装量为18ml的绿色溶液，含缓冲液、牛和鼠的蛋白、皂甙、去污剂和0.05％ ProClin 300保护剂。
3．酶结合物
1瓶(GE41/7G79-01)或3瓶(GE42/7G79-02)含1.1ml辣根过氧化酶标记HIV抗原或单克隆抗体的冻干粉，重溶后每瓶可供2块板使用。
4．酶结合物稀释液
1瓶(GE41/7G79-01)或3瓶(GE42/7G79-02)装量为22m1的黄色溶液，含缓冲液、牛蛋白、皂甙、去污剂和O.05％ ProClin 300保护剂。
酶结合物的重溶
轻拍装有酶结合物干粉的瓶子，将附着在橡胶塞上的冻干粉拍落，然后将整瓶的酶结合物稀释液倒入瓶中，盖上瓶盖，将瓶子轻轻颠倒几次混匀，至少放置30分钟使其溶解，每隔一段时间将瓶子旋转一下。酶结合物重溶后呈红色，如有必要，可将其重新倒回装酶稀释液的瓶中重溶后的酶结合物在2－8℃最长可保存4周。
5.抗－HIV-1阳性对照
1瓶经化学灭活的含有HIV-1抗体的人血清，装量为1.7ml（缓冲液中有牛白蛋白），该血清HBsAg和HCV抗体阴性，含0.05％ Bronidox保护剂。
6.抗－HIV-2阳性对照
1瓶经化学灭活的含有HIV-2抗体的人血清，装量为1.7ml（缓冲液中有牛白蛋白），该血清HBsAg和HCV抗体阴性，含0.05％ Bronidox保护剂。
7.HIV-1 p24阳性对照
1瓶经灭活的p24（人源细胞培养物），装量为1.7ml（缓冲液中有牛白蛋白）。
8.阴性对照
1瓶(GE41/7G79-01)或2瓶(GE42/7G79-02)正常人血清，装量为2.5ml，与HBsAg、HIV-1抗体、HIV-2抗体、HCV抗体和HTLV抗体阴性，含0.05％ Bronidox保护剂。
9.底物稀释液
1瓶含柠檬酸三钠和过氧化氢的无色溶液，装量为35ml。
10.底物浓缩液
1瓶含3，3’，5，5’－四甲基联苯胺（TMB）和稳定剂的橙色溶液，装量为35ml。
底物液
配制底物液时，取一个洁净的玻璃容器或新的聚苯乙烯瓶，将一定体积的无色底物稀释液加入等体积的橙色底物浓缩液中，稀释后溶液呈浅黄色。
必须按照如上配液顺序且配制底物液时所用的移液器及玻璃器皿必须干净。另外，还可以将整瓶底物稀释液倒入底物浓缩浓液瓶中来配制底物液。1瓶底物液的量足够5块板使用，见表1:
表1 所需底物浓缩液和底物稀释液的体积

若使用自动化系统所需要的底物液可能会多一些，底物液须避光保存。底物液应是浅黄色的；如果在使用前已是绿色，表明试剂失效，需弃掉重新配制。
配好的底物液可与其它Murex使用橙色底物浓缩液的试剂盒中的底物液互换使用，但要确保底物液是经底物浓缩液和底物稀释液共同配制的。
配好的底物液2－8℃稳定，在15－25℃可稳定2天，如果有结晶必须弃掉。
1.1.洗液
含0.2％ Bronidox保护剂的1瓶(GE41/7G79-01)或2瓶(GE42/7G79-02)含125ml，20倍工作浓度的甘氨酸/硼酸盐洗液。
根据需用量将浓缩洗液用蒸馏水或去离子水按1:20稀释或将整瓶浓缩洗液稀释到2500ml，稀释后的洗液中含0.01％ Bronidox保护剂。
稀释好的洗液可与其它Murex试剂盒中的甘氨酸／硼酸盐洗液互换使用，但要确认洗液装量及配制时准确稀释。
洗液放入密封容器中，室温条件下保存1个月，其活性不变。
注:洗液在存放过程中，可能会显浅黄色，但不影响试验结果。
注:尽管底物液和洗液可与其它Murex试剂盒中的同种液体互换使用，但若该成份已过效期时，不能使用。
警告和注意事项