DNA 恒温快速扩增试剂盒（胶体金试纸条型）
基本信息
产品名称：
DNA 恒温快速扩增试剂盒（胶体金试纸条型）
英文名称：
国产/进口：
国产
产地/品牌：
潍坊安普未来
型号：
参考报价：
销售商：
总点击数：
325
更新日期：
2022-04-21
产品类别：
性能参数
原理概述：
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术：在常温恒温下，重组酶和引物形成蛋白/单链核苷酸的复合体Rec/ssDNA，在辅助蛋白和单链结合蛋白SSB的帮助下，侵入双链DNA模板；在侵入位点形成D-loop区域，并开始对DNA双链进行扫描；待找到与引物互补的目的区域后，复合体Rec/ssDNA解体的同时，聚合酶也结合到引物的3’末端，开始链的延伸。依赖nfo酶的作用，加入根据模版设计的特异的分子探针，使用胶体金技术（三明治夹心法）可以对最终结果进行检测。
产品特点：
本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短（仅需12 mins）等优点，反应组分为干粉状态，操作简便，易于保存。
本试剂对设备要求低，金属浴、水浴锅等即可进行反应操作，无需购买PCR扩增仪等价格高昂的专属设备。
引物设计：
建议使用长度在 30-35 bp的引物，引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度；下游引物的5’端标记一个修饰基团（常用生物素）。引物设计避免形成二级结构而影响扩增；扩增子长度建议在150-300 bp，通常不超过500 bp。
荧光探针设计：
在上下游引物中间，设计一段长度为46-52nt与目的片段互补的序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）; 在5’端和3’末端的中部位置标记一个dSpacer（四氢呋喃，THF），作为nfo的识别位点；3’末端标记一个修饰基团，例如胺基、磷酸基团或C3-Spacer等。
试剂盒组成：
试剂盒储存：
运输条件：低温运输；
储存条件：储存温度 ≤ -20 ºC，避光保存，避免重压和反复冻融；
产品有效期：14个月。
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术：在常温恒温下，重组酶和引物形成蛋白/单链核苷酸的复合体Rec/ssDNA，在辅助蛋白和单链结合蛋白SSB的帮助下，侵入双链DNA模板；在侵入位点形成D-loop区域，并开始对DNA双链进行扫描；待找到与引物互补的目的区域后，复合体Rec/ssDNA解体的同时，聚合酶也结合到引物的3’末端，开始链的延伸。依赖nfo酶的作用，加入根据模版设计的特异的分子探针，使用胶体金技术（三明治夹心法）可以对最终结果进行检测。
产品特点：
本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短（仅需12 mins）等优点，反应组分为干粉状态，操作简便，易于保存。
本试剂对设备要求低，金属浴、水浴锅等即可进行反应操作，无需购买PCR扩增仪等价格高昂的专属设备。
引物设计：
建议使用长度在 30-35 bp的引物，引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度；下游引物的5’端标记一个修饰基团（常用生物素）。引物设计避免形成二级结构而影响扩增；扩增子长度建议在150-300 bp，通常不超过500 bp。
荧光探针设计：
在上下游引物中间，设计一段长度为46-52nt与目的片段互补的序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）; 在5’端和3’末端的中部位置标记一个dSpacer（四氢呋喃，THF），作为nfo的识别位点；3’末端标记一个修饰基团，例如胺基、磷酸基团或C3-Spacer等。
试剂盒组成：
| 组成 | 含量 |
| A buffer | 1.6 mL×1管 |
| B buffer | 150 μL×1管 |
| 试剂 | 48份 |
| 使用说明书 | 1份 |
运输条件：低温运输；
储存条件：储存温度 ≤ -20 ºC，避光保存，避免重压和反复冻融；
产品有效期：14个月。
操作步骤：提前30分钟将试剂盒所需组分取出，室温融化，震荡混匀。
1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响）；
2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针（引物和探针浓度为10 μM，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中）；
3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板（可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积，并相应调整加入的ddH2O体积，至模板与ddH2O总体积为13.5 μL）；
4) 最后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（请务必上下颠倒甩动反应管8-10次进行混匀；对于多个反应，建议将B buffer加至反应管的盖子内侧上下颠倒后混匀）；
5) 混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 ºC孵育8-12 mins；
6) 反应结束后，取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中，混合均匀后，将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡，5 mins内观察质控线与检测线判读结果。
体系配制
| 组分 | 体积（μL） |
| A buffer | 29.4 |
| 上游引物(10 μM) | 2 |
| 下游引物(10 μM) | 2 |
| 探针(10 μM) | 0.6 |
| ddH2O和核酸模板 | 13.5 |
| B buffer | 2.5 |
| 总体积 | 50 |
1． 由于试剂盒灵敏度非常高，在进行反应时请注意避免核酸污染，并设置空白对照；
2． 使用时，请取出实验所需的MIRA反应单元的数量，剩余部分请置于存储条件下。
公司简介
潍坊安普未来生物科技有限公司于2019年5月成立，位于山东潍坊高新区潍坊生物医药科技产业园，创业团队拥有1位博导，2位博士，4位硕士，拥有2项国内发明专利技术，技术应用与研发能力国内首屈一指。 团队历经十年技术沉淀，以代表未来生物检测技术趋势的多酶恒温快速扩增（Multienzyme Isothermal Rapid Amplification , MIRA）技术为核心，并基于MIRA核心平台技术、超快速核酸提取技术、荧光检测仪技术、全自动封闭检测系统技术和微流控技术的整合打造出分子检测领域整体解决方案，具有灵敏度高、特异性强、快速简便、污染风险小、现场作业等显著特点。 MIRA技术，是代表着检测领域未来技术趋势，依靠多种功能蛋白在常温恒温条件下实现核酸的快速扩增。反应温度为25-42 ℃，反应时间为15 mins，引物数量为2条，结果判读方式有琼脂糖凝胶电泳、荧光实时监测、胶体金试纸条。公司是目前国内罕见的对该核心技术所需全部功能蛋白具备完全自主供应能力的企业。 公司目前已形成恒温快速扩增试剂、动物疫病检测(涵盖猪腹泻、猪瘟、非洲猪瘟、伪狂犬等全部猪疫病检测项目和家禽大部分检测项目等）、小宠物疾病检测（涵盖猫，狗疾病检测项目）、水产疫病检测、公共卫生与食品安全检测、转基因作物检测等各大类基于MIRA技术开发的科研试剂和超快速核酸提取试剂的稳定供应能力；并提供各型配套的便携式荧光检测仪和基于POCT概念的检测仪等系列产品。
售后服务
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山东省潍坊市高新技术开发区生物医药科技园G座
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