原代食管癌完全培养基
食管癌完全培养基是一种为促进食管癌原代细胞体外生长而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在5% CO2/95%空气的培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个合适的平衡的营养环境,选择性地促进体外人食管鳞癌原代细胞的生长。
4℃避光保存2个月内有效。
1.食管癌原代细胞培养
至少提前半小时使用稀释后的Matrigel基质胶预铺培养瓶/板,使用前吸干基质胶,用稀释液润洗一遍。将分离并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数量接种于培养瓶/板,补加完全培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,表面消毒后置培养箱,37 ℃ 、5 % CO2条件培养;原代细胞初次接种后2-3 天内勿动(利于细胞贴壁),第一次换液建议换半液。
2.食管癌原代细胞传代
镜下观察细胞形成克隆,且汇合度80~90%时即可传代;培养箱中取出细胞,弃旧培养液,加入适量0.05%胰酶,37℃孵育,5 min后拿出轻拍培养瓶/板侧面,显微镜下观察细胞消化情况;细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用终止培养基终止消化,并将细胞转移至离心管中,1500 rpm离心3 min;弃上清,以1-2 mL完全培养基重悬细胞,活细胞计数,将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板,补加完全培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,表面消毒后置培养箱,37 ℃ 、5 % CO2条件培养。其他步骤同上。
武汉英科生物技术有限公司位于武汉东湖国家新技术开发区,凝聚了一批博士、硕士为技术主体,著名专家和经济师为骨干的管理队伍,拥有国际标准的纳米材料制备平台,抗原抗体生产实验室,检测试剂生产车间,胶体金检测卡生产线和分子检验设备生产平台。
公司与中国科学院、中国检验检疫学院、美国麻省理工学院、华中科技大学和南京大学等单位建立了合作关系。公司重点开发食品安全检测系统、动物安全诊断系统、检测试剂、纳米材料和分子检测设备等产品;以新型的企业发展思想、科学的管理模式、先进的生产标准、健全的服务体系致力于高新检测分析技术系统广泛应用于生产生活等领域。
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公司秉承“品质至上,国际标准”的发展宗旨,以“建设一流产业基地,打造百年企业品牌”为方向,以“产、学、研相结合,科、工、贸一体化”为营运模式,“以领先的技术,提供优质的服务”为目标,力争成长为服务于全球的高新技术企业。