大肠埃希氏菌O157:H7/Nm生化鉴定

产品名称：EasylD大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定试剂盒

英文名称：EasylD Biochemical Identification Kit for Escherichia coli O157:H7/NM

包装规格：10测试/盒

产品编号：HKI006

产品简介：本试剂盒基于一步加样技术，用于大肠埃希氏菌O157:H7/NM的生化鉴定(GB4789.36)。

产品组分：
      主要组分：EasylD大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定条10条、半固体琼脂10瓶、氧化酶试剂1瓶。
      其它组分：悬浮培养基10瓶、麦氏比浊管1瓶、靛基质试剂1瓶、 无菌液体石蜡1瓶、VP试剂甲液1瓶、VP试剂乙液1瓶、 甲基红试剂1瓶、记录表1册、产品说明书1份。

储存条件与保质期：2〜8°C保存，有效期见试剂盒外标签。

使用指南：
      1，从选择性平板上挑取可疑单菌落（需预先确保增菌和分离均符合大肠 埃希氏菌O157:H7/NM典型特征）接种于营养琼脂或TSA平板进行纯化；
      2，取鉴定条、悬浮培养基、半固体琼脂，使用前平衡至室温；开启半固体琼脂；
      3，挑取经纯化的分离株新鲜菌苔于悬浮培养基中，制成0.5麦氏浊度的均一菌悬液；同时接种同一菌株于三糖铁琼脂（需另外购买）和半固体琼脂中；
      4，取小块洁净滤纸（需自备），滴加1滴氧化酶试剂，用无菌玻棒或塑料接种环挑取同一可疑菌落并涂于纸片上，30秒内观察滤纸片颜色， 按表3并对照比色卡记录结果，用完旋紧瓶盖并放回试剂盒并置于2〜8°C保存；
      5，从底座上取下鉴定条，并从鉴定条右侧向左掀开贴膜，用移液器小心注入2mL菌悬液于分液槽中（避免使菌液提前流入反应孔），贴回贴膜，并依次抬起左右两侧数次，使菌悬液液面达同一高度，然后水平托起分液槽端，确保菌液流入各反应孔中，贴紧薄膜并放回底座。 再次从右侧掀开贴膜，向第6、7、8号孔中各滴加3〜4滴无菌液体石蜡，贴紧薄膜；
      6，将接种的鉴定条和反应管置于36°C±1°C培养养（培养时间按表3）；培养完毕, 记录三糖铁琼脂培养结果，按表3并对照比色卡读取鉴定条第1、3~8孔情况并记录结果；取下鉴定条并置于365nm紫外灯下，观察第2孔是否有蓝色荧光，然后取出鉴定条置自然光下，掀开贴膜，分别向第9孔滴加2滴靛基质试剂，向第10孔逐滴滴入3滴VP试剂甲液和2滴VP试剂乙液，向第11孔小心滴加1滴甲基红试剂，不贴紧贴膜，反应孔透气10min后，记录结果； 
      7，综合菌落形态和GB4789.36大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化试验反应结果（见表2 ）进行判读。

注意事项：
      1，需要使用者自备的试剂及用品有：三糖铁琼脂、洁净滤纸、微量移液器及无菌吸头、生化培养箱等；
      2，所含悬浮培养基为本试剂盒专用，不可替换或用于其他试验；
      3，反应名称加上划线表示接种后培养前需添加配套试剂，反应名称加下划线表示培养结束后添加配套试剂；
      4，甲基红试剂流动性强，滴加该试剂时应特别小心，防止试剂滴入其他的反应孔；未用完的配套试剂应旋紧瓶盖放回包装盒中并置于2〜8°C下保存；
      5，向分液槽中加入菌液后，尽量分散均匀；极个别情况有反应孔分液量接近于100μL，但不影响反应结果；
      6，为避免污染，务必在超净工作台或生物安全柜中进行接种和添加配套试剂，培养前务必贴紧贴膜；
      7，如果鉴定条已过期，或铝箔袋破损，请勿使用；
      8，本说明书需重复使用，请妥善保管。

废物处理：带菌的鉴定条、吸头和悬浮培养基等试验材料应置121 °C下湿热灭菌 30min之后，按医疗垃圾相应的处理方式处理。

执行标准：QS/BHK 0002-2020 Easy ID生化鉴定试剂盒

参考文献：GB 4789.36 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验