细胞株/菌种

大鼠肝窦内皮细胞

基本信息
产品名称:
大鼠肝窦内皮细胞
英文名称:
Rat sinusoidalendothelial cell
国产/进口:
国产
产地/品牌:
深圳/立沃LV-BIOTECH
型号:
LV-RLSE001
参考报价:
总点击数:
238
更新日期:
2022-02-16
产品类别:

性能参数
货号:LV-RLSE001

细胞数:1 million/vial

产品形式:冻存(现货/P1代)、新鲜培养(需定制)

报价:询价(19902901483)

用途:仅用于科学研究与生物医药研发。
 
大鼠肝窦内皮细胞

Rat sinusoidalendothelial cell

(可贴壁,Cat# LV-RLSE001

(仅用于科学研究)
 
您使用时,请按随货的说明书操作,如有任何疑问可咨询公司技术人员。

简介

肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells, LSEC)在肝脏的生理功能和病理机制的发生中扮演重要的角色, 成为近年来肝脏研究的热点。本产品采用酶灌注消化法分离至SPF级大鼠,保留了细胞在体内的生物活性;通过梯度离心除掉了其它肝脏细胞,具有超高纯度(>90%)。经检测无细菌、真菌、放线菌等污染,细胞活力高(冻存>85%,新鲜培养>95%)。

II  试剂与材料

-大鼠肝窦内皮细胞(Cat# LV-RLSE001)   
        
-复苏培养基(Cat#LV-Rec001)

-肝窦内皮细胞培养基(Cat# LV-RLSEM001)    
  
-胶原包被培养板(LV-coated)

-碎冰及冰盒             
                        
-无菌15ml离心管(冰上预冷)

-一次性移液管      
                             
-恒温水浴锅(38℃预热)

-宽口移液枪头(普通枪头剪去尖头,再灭菌使用)

-移液枪

-冷冻水平离心机(带水平转子,可离心15ml离心管)       

-生物安全柜

-37℃/5%CO2培养箱         
                 
-75%酒精

III 细胞的复苏与铺板

1.       将15ml离心管插入盛有足量碎冰的冰盒中,紫外消毒15min;4℃预冷离心机。

2.       复苏培养基放碎冰中充分预冷,铺板培养基放入38℃恒温水浴锅中充分预热。

3.       将冻存的细胞从冷藏位置迅速转移至38℃恒温水浴锅中。尽可能多的浸入38℃水中,顺时针水平摇动,但必须确保冻存管管盖保持在水面以上

4.       解冻冻存管约90-120s,至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。

5.       用75%酒精消毒冻存管,并将其转移到生物安全柜。

6.       用宽口枪头将细胞重悬(轻轻吹打2次),并转移至预冷的15ml离心管中(注意:冻存管与枪头上残留细胞,可用1ml复苏培养基清洗冻存管与枪头)。

7.       向细胞悬液逐滴加入预冷复苏培养基,每1ml细胞悬液加入10ml复苏培养基(注意:前3ml要缓慢逐滴加入并轻微摇晃,后面7ml可加快速度),最后轻微上下颠倒1次混匀。

8.       300×g,4℃离心5min,去上清并用培养基重悬。

9.       沉淀的细胞用肝窦内皮细胞培养基重悬并定容至4ml,用台盼蓝排除法测定细胞的存活率和细胞总量。

10.    将细胞按3×104cells/cm2接种至胶原包被培养板中。摇匀,在37℃/5% CO2培养箱中培养,24h后换液。

IV 细胞培养与传代

1.       细胞融合度达到80%时可进行传代。

2.       提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。

3.       吸除旧培养液,加少量PBS润洗细胞,适量胰酶,使加入的胰酶能盖住细胞,37℃孵育,约2~3min。

4.       显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜肝窦内皮细胞培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液(控制吹打的力度,避免产生大量的气泡)。

5.       300×g,室温离心5min,去上清并用培养基重悬。

6.       将细胞悬液按3×10cells/cm接种到新的胶原包被培养瓶/板内, 置37℃/5%CO培养箱培养,隔天观察贴壁生长情况。

IV 关于售后

如您发现有产品任何质量问题,请您收集原始数据,请第一时间联系公司销售或者技术支持,公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同,操作人员习惯不同,熟练程度不一样,实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限,公司不做售后,请老师理解与支持。
售后有效期与提供的原始数据:

复苏问题:复苏24小时以内;提供台盼蓝染色或者PI染色。

污染问题:复苏96小时以内;提供相差显微镜照片。

纯度问题:一个月内;提供免疫荧光或者流式结果。

联系电话

公司电话:0755-28284050;

技术支持:19902901483(周博士)
 
公司简介
立沃生物科技(深圳)有限公司 (Liver Biotechnology (Shenzhen) Co., Ltd),坐落于深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园,是国内专业从事原代细胞分离、冻存、再生的国家高新技术企业,拥有国家生物二级实验室、ISO9001质量管理体系认证、GB/T29490-2013知识产权贯标认证。瞄准糖尿病、肝衰竭、肿瘤等重大临床疾病,聚焦未来精准医疗新技术,开发胰岛细胞治疗、肝细胞/人工肝治疗、肿瘤精准用药等新方法和新产品,转化于深圳未来医院,满足深圳市乃至全国的重大临床需求。公司首席科学顾问由美国医学与生物工程院院士担任,拥有国家杰青、国家“973”首席科学家、深圳市高层次人才等多名技术专家,拥有博士后、博士、硕士、本科等全职工作人员20余人。目前,公司正式落户于深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园,拥有2000+平方米实验室、2000+平方米办公场地、2000+万仪器设备、SPF级动物房等,配套建设有1000平方米GMP车间。 有需要合作的同行可随时咨询! 合作咨询:0755-28284050 下单咨询:181-2981-2531微信同号(邓)9540132657 技术支持:199-0290-1483微信同号(周)7788987205 网址: https://www.liver-biotech.com 地址:深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园A10栋

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