产品组成:
试剂盒组成 |
DP201(50T) |
保存温度 |
裂解液 |
30mL |
RT |
洗涤液 |
10mL |
RT |
洗脱液 |
10mL |
RT |
吸附柱(A 管) |
50个 |
RT |
收集管(B 管) |
50个 |
RT |
说明书 |
1份 |
RT |
注意:洗涤液在初次使用前加入 40mL 无水乙醇,并于室温保存。
储存条件:
该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存 12 个月。长期保存时需置于 2-8℃。
产品说明:
总 DNA/RNA 提取试剂盒适合于快速从组织、血液、分泌物、排泄物等样品中提取高纯度的包含病毒、细菌及寄生虫等生物的总核酸。试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀,获得的核酸可直接用于 PCR/RT-PCR、Sorthern 杂交/Northern 杂交、以及 LAMP/RT-LAMP 等系列下游实验。
产品原理:
总 DNA/RNA 提取试剂盒基于硅胶柱纯化方式。样品在裂解液的作用下裂解,将核酸释放到裂解液中。核酸在高盐的环境下通过硅胶柱时将被吸附在硅胶柱的膜上,而蛋白质则不被吸附而去除。吸附了核酸的滤膜经洗涤去除残留的蛋白质和盐,最后可以用 DEPC 处理水洗脱滤膜上吸附的核酸,得到的核酸纯度高,可直接用于各种下游实验。
操作步骤:
1. 样品制备(前处理):
血液样品:取>500µL EDTA 抗凝血离心 30s,取 200µL 上清液进入后续步骤。
组织样品:取 0.05~1g 的组织样品,加入 5~10 倍生理盐水研磨至匀浆,取 200µL 匀浆液
进入后续步骤。
分泌物、粪便样品:使用棉拭子在生理盐水中浸润后在采样部位翻转涂抹,完成采集后将拭子头掰下放入含 1mL 生理盐水的离心管中涡旋 30s,取 200µL 混匀液进入后续步骤。
2. 取步骤 1 中制备的 200µL 样品至 1.5mL 离心管中,加入 500µL 裂解液,颠倒混匀,静
置 5min 裂解,10,000rpm 离心 3min。
3. 取 400uL 上清液至新的 1.5mL 离心管中,加入 200µL 无水乙醇,涡旋混匀 20s。
4. 把管 A 装在 2mL 管 B 中,将步骤 3 中的混匀液全部转移至 A 管中,10,000rpm 离心
1min。
5. 倒弃管 B 中的滤液,把管 A 装回管 B 中,加入 600µL 洗涤液至管 A 中,10,000rpm 离
心 1min。
6. 倒弃管 B 中的滤液,把管 A 装回管 B 中,10,000rpm 离心 2min。
7. 把管 A 装在新的 1.5mL 离心管中。加入 50µL 洗脱液至管 A 中,静置 1-2min,10,000rpm
离心 1min,所得溶液即为样品总核酸溶液。若暂时不用,于-80℃储存。
注意事项:
1. 为确保检测结果准确,请严格按照说明书操作。
2. 试剂盒内管 A 与管 B 为一次性用品,请勿重复使用。
3. 所有用于检测的废弃物品均应放入含消毒液的废物缸内,浸泡消毒;实验结束后立即
用 1%次氯酸钠或 75%酒精消毒工作台。
4. 实验过程中实验人员应佩戴手套、口罩,穿着实验服,避免试剂、样品与人体接触实验过程中应尽量避免接触 A 管和离心管的管口,在进行操作步骤 1~4 时若有样品溶液粘在手套上或溅出,应立即更换手套并清洁溅出液;所有接触病料的物品均应合理处置。
5. 本品仅供动物病原检测实验使用,请勿用于其他用途。