质粒小提试剂盒
基本信息
产品名称：
质粒小提试剂盒
英文名称：
国产/进口：
国产
产地/品牌：
河北三狮生物
型号：
50T/100T/200T
参考报价：
130-390元
销售商：
总点击数：
224
更新日期：
2022-02-18
产品类别：
性能参数
产品组成
储存条件
该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月。RNase A -20℃长期保存，2-8℃可稳定保存。若溶液产生沉淀，可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA（将试剂盒中提供的RNaseA全部加入），混匀，置于2-8℃保存。单独包装的RNase A -20℃稳定保存12个月以上。
产品说明：
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性结合溶液中DNA的原理特异性提取质粒DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤:
1、取1-5ml细菌培养物，12000rpm离心1min，尽量吸除上清（菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250ul溶液Ⅰ（请先检查是否已加入RNase A），使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意：如果菌块未彻底混匀，会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入250ul溶液Ⅱ，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意：混匀一定要温和，以免打断细菌基因组DNA进而造成污染，此时菌液应变得清亮粘稠，作用时间不要超过5min，以免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入350ul溶液Ⅲ，立即温和地上下翻转6-8次，充分混匀，此时会出现白色絮状沉淀。12000rpm离心10min，用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中，尽量不要吸出沉淀。注意：溶液Ⅲ加入后应立即混合，避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀，可再次离心后取上清。
5、将上一步所得上清液加入吸附柱中（吸附柱加入收集管中），室温放置2min，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入700ul漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
8、12000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温放置数分钟，目的是去除吸附柱中残余的漂洗液，否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验，如酶切、PCR等。
9、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置2min，12000rpm离心1min。
10、为了增加质粒的回收效率，可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心1min。提取获得的质粒DNA经浓度及纯度检测后于-20℃保存。
注意事项:
1、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现象，可经37℃水浴，待溶液恢复澄清后再使用。溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用时避免直接接触，后应立即拧紧盖子。
2、洗脱缓冲液体积不应少于50ul，体积过小影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影晌，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右（可用NaOH将水的pH值调至此范围），pH值低于7.0会降低洗脱效率，提取产物应保存在-20℃，以防降解。
3、 如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，使用5-10ml过夜培养物，同时按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率。
4、浓度及纯度检测：得到的质粒DNA纯度可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计进行检测，其与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50ug/ml双链DNA、40ug/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响吸光值，但并不表示纯度低。
| 试剂盒组成 | DP001-01（50T） | DP001-02（100T） | DP001-03（200T） | 保存温度 |
| RNase A | 300ul | 500ul | 1000ul | -20℃ |
| 溶液Ⅰ | 15ml | 30ml | 60ml | RT |
| 溶液Ⅱ | 15ml | 30ml | 60ml | RT |
| 溶液Ⅲ | 20ml | 40ml | 80ml | RT |
| 漂洗液 | 15ml | 15ml×2 | 30ml×2 | RT |
| 洗脱液 | 15ml | 30ml | 60ml | RT |
| 吸附柱 | 50个 | 100个 | 200个 | RT |
| 收集管 | 50个 | 100个 | 200个 | RT |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 1份 | — |
该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月。RNase A -20℃长期保存，2-8℃可稳定保存。若溶液产生沉淀，可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA（将试剂盒中提供的RNaseA全部加入），混匀，置于2-8℃保存。单独包装的RNase A -20℃稳定保存12个月以上。
产品说明：
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性结合溶液中DNA的原理特异性提取质粒DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤:
1、取1-5ml细菌培养物，12000rpm离心1min，尽量吸除上清（菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250ul溶液Ⅰ（请先检查是否已加入RNase A），使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意：如果菌块未彻底混匀，会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入250ul溶液Ⅱ，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意：混匀一定要温和，以免打断细菌基因组DNA进而造成污染，此时菌液应变得清亮粘稠，作用时间不要超过5min，以免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入350ul溶液Ⅲ，立即温和地上下翻转6-8次，充分混匀，此时会出现白色絮状沉淀。12000rpm离心10min，用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中，尽量不要吸出沉淀。注意：溶液Ⅲ加入后应立即混合，避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀，可再次离心后取上清。
5、将上一步所得上清液加入吸附柱中（吸附柱加入收集管中），室温放置2min，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入700ul漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
8、12000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温放置数分钟，目的是去除吸附柱中残余的漂洗液，否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验，如酶切、PCR等。
9、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置2min，12000rpm离心1min。
10、为了增加质粒的回收效率，可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心1min。提取获得的质粒DNA经浓度及纯度检测后于-20℃保存。
注意事项:
1、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现象，可经37℃水浴，待溶液恢复澄清后再使用。溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用时避免直接接触，后应立即拧紧盖子。
2、洗脱缓冲液体积不应少于50ul，体积过小影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影晌，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右（可用NaOH将水的pH值调至此范围），pH值低于7.0会降低洗脱效率，提取产物应保存在-20℃，以防降解。
3、 如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，使用5-10ml过夜培养物，同时按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率。
4、浓度及纯度检测：得到的质粒DNA纯度可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计进行检测，其与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50ug/ml双链DNA、40ug/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响吸光值，但并不表示纯度低。
公司简介
石家庄赛迪生物科技有限公司成立于2015年，是一家提供实验室检测设备、实验室建设整体解决方案的综合服务性公司。公司团队由从事实验室检测设备市场多年的销售团队和各大院校生物相关专业技术人员组成。公司根据客户不同需求，提供实验室构建方案，优势产品整合，技术培训等。目前公司和华南农业大学、暨南大学、河北农业大学等多所高校有产品联合开发项目，拥有专业的销售团队和技术服务团队。为了给客户提供全面完善的实验室构建服务方案，目前公司产品包括实验室通用设备，食品安全分子检测产品设备，试剂耗材等等。
公司总经理时凡荣获2015年河北省优秀青年创业奖，河北农业大学优秀毕业生创业实践类项目特等奖，曾在广州知名生物科技公司担任营销总监一职，2015年带领原来的销售以及技术团队建立该公司。凭借过硬的技术和良好的服务质量赢得了市场诸多客户的认可，自公司创建以来，服务客户对象包括北京食品药品监督管理局、青县市场监督管理局、武强县食品和市场监督管理局等多个政府检测机构。
公司本着“以人为本、服务至上”的经营理念，“厚德载物、勇于开拓”的企业精神，以优质的产品和专业的服务，为工商、食品药品监督、高校、农业等行业提供完善的实验室仪器设备集成以及实验室建设解决方案和技术支持。
公司使命：用最优势的产品和服务方法解决中国食品安全问题，服务大众，回报社会。
公司总经理时凡荣获2015年河北省优秀青年创业奖，河北农业大学优秀毕业生创业实践类项目特等奖，曾在广州知名生物科技公司担任营销总监一职，2015年带领原来的销售以及技术团队建立该公司。凭借过硬的技术和良好的服务质量赢得了市场诸多客户的认可，自公司创建以来，服务客户对象包括北京食品药品监督管理局、青县市场监督管理局、武强县食品和市场监督管理局等多个政府检测机构。
公司本着“以人为本、服务至上”的经营理念，“厚德载物、勇于开拓”的企业精神，以优质的产品和专业的服务，为工商、食品药品监督、高校、农业等行业提供完善的实验室仪器设备集成以及实验室建设解决方案和技术支持。
公司使命：用最优势的产品和服务方法解决中国食品安全问题，服务大众，回报社会。
售后服务
相关视频
暂无
资料下载
暂无
联系方式
| 单位名称： |
|
详细地址：
石家庄高新区天山大街585号日中天科技园总部大厦2708
|
|
qq：
|
|
联系电话：
0311-82970259
|
| Email： |
