探针法热启动酶2*PCR预混液
基本信息
产品名称：
探针法热启动酶2*PCR预混液
英文名称：
2× Probe qPCR Mix
国产/进口：
国产
产地/品牌：
河北三狮生物
型号：
1ml
参考报价：
130元
销售商：
总点击数：
135
更新日期：
2022-02-18
产品类别：
性能参数
产品简介：
本产品是采用探针法进行Real Time PCR的专用试剂，含有抗体封闭型热启动酶，能够有效抑制低温条件下引物非特异性退火或者引物二聚体引起的非特异性扩增，提高扩增反应的特异性。本产品具备较高的扩增效率和检测灵敏度，可以在较宽的定量区域内得到良好的标准曲线，准确进行定量，同时与多数厂家的荧光定量PCR仪兼容，如Applied Biosystems、Eppendorf、Bio-Rad和Roche等。
试剂内容：
2×Probe qPCR Mix 1 ml
自备：
ROX Reference Dye I（50×）
ROX Reference Dye II（100×）
注意：
ROX Reference Dye用以校正部分公司Real Time PCR扩增仪的孔间荧光信号误差。
ROX Reference Dye I (50×) 适用于：ABI PRISM 7000/ 7700/ 7300/ 7900HT、Step One Plus Real-Time PCR System。
ROX Reference Dye II (100×) 适用于：7500 Real-Time PCR System、7500 Fast Real -Time PCR System、Stratagene Mx3000P、Mx3005P、Mx4000。
ROX Reference Dye I、II反应终浓度均为1×。
LightCycler、Thermal Cycler Dice Real Time System II、Smart Cycler System等Real Time PCR 扩增仪不需使用。
操作方法：
1）配制PCR反应体系：
解冻后使用前应充分颠倒混匀，瞬时离心后使用，避免产生大量气泡。避免反复多次冻融，若经常使用请保存在4℃。按下列组份配制PCR反应液（反应液配制请在冰盒上进行）：
注意：
1、使用的引物终浓度可在0.2～1.0 μM范围内调整，DNA模板可根据浓度进行适当调整。
2、使用的探针浓度可在0.1-0.3 μM范围内优化。可进行浓度梯度的实验，寻找引物和探针的最佳组合。探针的使用与Real Time PCR扩增仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，请参照仪器说明书或各荧光探针的具体使用要求进行调整。
3、对于退火温度较低的引物或超过200 bp的长片段扩增，建议采用三步法。
4、扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR反应完成后切勿打开反应管。以最大限度的减少PCR产物对检测环境的污染。2）PCR反应程序：
通常情况下，可以采用两步法进行反应；如果两步法扩增不理想，可以采用三步法设置PCR反应程序。
请根据引物选择合适的退火（延伸）温度。通常引物的Tm值设计在60℃左右。
3）实验结果分析：
反应结束后，对实验结果进行分析。详细分析方法参见Real Time PCR 扩增仪操作手册。
本产品是采用探针法进行Real Time PCR的专用试剂，含有抗体封闭型热启动酶，能够有效抑制低温条件下引物非特异性退火或者引物二聚体引起的非特异性扩增，提高扩增反应的特异性。本产品具备较高的扩增效率和检测灵敏度，可以在较宽的定量区域内得到良好的标准曲线，准确进行定量，同时与多数厂家的荧光定量PCR仪兼容，如Applied Biosystems、Eppendorf、Bio-Rad和Roche等。
试剂内容：
2×Probe qPCR Mix 1 ml
自备：
ROX Reference Dye I（50×）
ROX Reference Dye II（100×）
注意：
ROX Reference Dye用以校正部分公司Real Time PCR扩增仪的孔间荧光信号误差。
ROX Reference Dye I (50×) 适用于：ABI PRISM 7000/ 7700/ 7300/ 7900HT、Step One Plus Real-Time PCR System。
ROX Reference Dye II (100×) 适用于：7500 Real-Time PCR System、7500 Fast Real -Time PCR System、Stratagene Mx3000P、Mx3005P、Mx4000。
ROX Reference Dye I、II反应终浓度均为1×。
LightCycler、Thermal Cycler Dice Real Time System II、Smart Cycler System等Real Time PCR 扩增仪不需使用。
操作方法：
1）配制PCR反应体系：
解冻后使用前应充分颠倒混匀，瞬时离心后使用，避免产生大量气泡。避免反复多次冻融，若经常使用请保存在4℃。按下列组份配制PCR反应液（反应液配制请在冰盒上进行）：
| 试剂 | 25 μl体系 | 终浓度 |
| 2×Probe qPCR Mix | 12.5 μl | 1× |
| Primer 1 (10 μM) | 0.5-2.5 μl | 0.2-1.0 μM |
| Primer 2 (10 μM) | 0.5-2.5 μl | 0.2-1.0 μM |
| Probe | 1 μl | - |
| ROX Reference Dye I or ROX Reference Dye II | 0.5 μl or 0.25 μl | 1× |
| Template DNA | 5 μl | - |
| ddH2O | Up to 25 μl | - |
1、使用的引物终浓度可在0.2～1.0 μM范围内调整，DNA模板可根据浓度进行适当调整。
2、使用的探针浓度可在0.1-0.3 μM范围内优化。可进行浓度梯度的实验，寻找引物和探针的最佳组合。探针的使用与Real Time PCR扩增仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，请参照仪器说明书或各荧光探针的具体使用要求进行调整。
3、对于退火温度较低的引物或超过200 bp的长片段扩增，建议采用三步法。
4、扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR反应完成后切勿打开反应管。以最大限度的减少PCR产物对检测环境的污染。2）PCR反应程序：
通常情况下，可以采用两步法进行反应；如果两步法扩增不理想，可以采用三步法设置PCR反应程序。
| 方法/步骤 | 两步法real-time PCR | 三步法real-time PCR | 循环数 |
| 95℃（预变性） | 2-5 min | 2-5 min | 1 |
| 95℃（变性） | 10-20 sec | 10-20 sec | 35-45 Cycles |
| 55℃-60℃（退火） | 20 sec - 1 min（采集荧光） | 10-20 sec | |
| 72℃（延伸） | — | 20 sec - 1 min（采集荧光） |
3）实验结果分析：
反应结束后，对实验结果进行分析。详细分析方法参见Real Time PCR 扩增仪操作手册。
公司简介
石家庄赛迪生物科技有限公司成立于2015年，是一家提供实验室检测设备、实验室建设整体解决方案的综合服务性公司。公司团队由从事实验室检测设备市场多年的销售团队和各大院校生物相关专业技术人员组成。公司根据客户不同需求，提供实验室构建方案，优势产品整合，技术培训等。目前公司和华南农业大学、暨南大学、河北农业大学等多所高校有产品联合开发项目，拥有专业的销售团队和技术服务团队。为了给客户提供全面完善的实验室构建服务方案，目前公司产品包括实验室通用设备，食品安全分子检测产品设备，试剂耗材等等。
公司总经理时凡荣获2015年河北省优秀青年创业奖，河北农业大学优秀毕业生创业实践类项目特等奖，曾在广州知名生物科技公司担任营销总监一职，2015年带领原来的销售以及技术团队建立该公司。凭借过硬的技术和良好的服务质量赢得了市场诸多客户的认可，自公司创建以来，服务客户对象包括北京食品药品监督管理局、青县市场监督管理局、武强县食品和市场监督管理局等多个政府检测机构。
公司本着“以人为本、服务至上”的经营理念，“厚德载物、勇于开拓”的企业精神，以优质的产品和专业的服务，为工商、食品药品监督、高校、农业等行业提供完善的实验室仪器设备集成以及实验室建设解决方案和技术支持。
公司使命：用最优势的产品和服务方法解决中国食品安全问题，服务大众，回报社会。
公司总经理时凡荣获2015年河北省优秀青年创业奖，河北农业大学优秀毕业生创业实践类项目特等奖，曾在广州知名生物科技公司担任营销总监一职，2015年带领原来的销售以及技术团队建立该公司。凭借过硬的技术和良好的服务质量赢得了市场诸多客户的认可，自公司创建以来，服务客户对象包括北京食品药品监督管理局、青县市场监督管理局、武强县食品和市场监督管理局等多个政府检测机构。
公司本着“以人为本、服务至上”的经营理念，“厚德载物、勇于开拓”的企业精神，以优质的产品和专业的服务，为工商、食品药品监督、高校、农业等行业提供完善的实验室仪器设备集成以及实验室建设解决方案和技术支持。
公司使命：用最优势的产品和服务方法解决中国食品安全问题，服务大众，回报社会。
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