Trizol 裂解液
基本信息
产品名称：
Trizol 裂解液
英文名称：
国产/进口：
进口
产地/品牌：
美国/THERMO
型号：
15596026
参考报价：
销售商：
总点击数：
794
更新日期：
2022-04-19
产品类别：
性能参数
nvitrogen TRIzol 产品被数万篇文献引用，证明该试剂深受广大分子生物学家信赖，能够从多种生物学材料中提取高质量、完整的 RNA。
TRIzol 试剂分为若干即用型形式。个别产品还可量身定制，用于从不同的生物来源（包括人类、动物、植物、酵母、细菌和病毒）的样品中分离总 RNA 或同时分离 RNA、DNA 和蛋白质。
原始样品类型：细菌，血液，细胞，植物样本，组织，病毒样本，酵母
描述 从组织和细胞中分离总 RNA，包括富含脂肪组织和难提取样品。
终产物：总 RNA，转录组 RNA，MicroRNA
纯化时间：1 小时
应用：克隆，Northern Blotting，核酸酶保护实验，实时荧光定量 PCR (qPCR)，逆转录 PCR (RT-PCR)），cDNA 文库构建
操作方法：
1、细胞裂解：
组织样本： Trizol用量：每 50-100 mg 组织加 1 ml Trizol，样品体积不应超过 Trizol 体积的 10％。
（1）将动物或植物组织切成小块，在液氮中磨碎或用匀浆器匀浆处理。
（2）将研磨好的组织粉末快速转入装有 1 ml Trizol 的 2 ml 离心管中，在涡旋振荡器上迅速振荡混匀，置于冰上， 待所有的样品研磨完。
（3）裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。对于富含蛋白、脂肪或多糖物质的组织样品如肌肉、脂肪组织和植物结节部位等，匀浆后仍会存留有不溶物质，可于 4℃ 12,000 x g 离心 10 min，然后吸取上清至一新的离心管中。
细胞样本：
（1）贴壁细胞：吸尽培养液，每 10 cm2培养面积（6 孔板单孔或 35 mm 平皿）加入 1 ml Trizol，用加样器吹打数次，以确保细胞完全裂解，然后转移至离心管中。 注：Trizol 的使用量应由培养皿表面 积决定，而非由细胞数目决定。Trizol 量不足可能导致提取的 RNA 中有 DNA 污 染 。
（2）悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，每 5-10×106动植物或酵母细胞，或每 1×107细菌细胞加入 1ml Trizol， 用加样器吹打，使其完全裂解，然后转移至离心管中。 注：添加 Trizol 前切勿洗涤细胞 ，以免 RNA 降解。必要时可以用匀浆器来裂解某些细菌或者酵母细胞 。
2、液相分离：
（1）裂解产物于室温放置 5 min，使核酸-蛋白复合物完全分离。（注：此时样品可在-80℃长期保存。 ）
（2）每 1 ml Trizol 加入 0.2 ml 氯仿，盖紧管盖，剧烈振荡 15 s，室温放置 2-3 min。
（3）4℃ 12,000 x g 离心 15 min，样品会分成三层：桔黄色的下层有机相，中间层和无色的上层水相。
（4）吸取含总 RNA 的上层水相至一新的离心管中，吸取水相的体积为所用 Trizol 试剂的 60％。
3、RNA 回收
（1）按照每 1 ml Trizol 的最初使用量加入 0.5 ml 异丙醇，颠倒数次混匀，室温放置 10 min。
（2） 4℃ 12,000 x g 离心 10 min，弃除上清，可见胶状的 RNA 沉淀。
（3）按照每 1 ml Trizol 的最初使用量加入 1 ml 75%乙醇，颠倒数次混匀，洗涤沉淀。
（4）4℃ 12,000 x g 离心 5 min，弃除上清。
（5）室温倒置 5-10 min 晾干或真空抽干（不要使用真空干燥离心机，以免 RNA 过干，难以溶解）。
（6）加入适量（如 25ul） DEPC-ddH2O 或 TE 缓冲液，用加样器吹打数次溶解 RNA。
（7）通过 RNA 电泳以及紫外分光光度计检测，确定 RNA 的浓度、纯度和完整性。
（8）所得的 RNA 应立即使用或适量分装后-80℃保存，避免反复冻融。
注意事项：
1、如果需要测量 RNA 的 A260/A280 的比值，建议使用 RNA 定量缓冲液对样品稀释后，进行测量。
2、所有离心管，枪头及相关溶液都必须无 RNA 酶污染。耐高温器物可 180℃烘烤 4 小时以去除RNA 酶，其它器物去除 RNA 酶可考虑用 0.01%的 DEPC 水浸泡过夜，然后灭菌，烘干。溶液需用 DEPC 水配制。加 0.01% DEPC 至重蒸水或 MiliQ 级水中，处理过夜，灭菌即成 DEPC 水。
3、使用冻存的细胞或组织抽提总 RNA 的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的 RNase 会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽 RNA， 推荐先加入适量 Trizol，并裂解样品后冻存。
4、必须戴一次性手套操作，且尽量不要对着 RNA 样品呼气或说话，以防 RNA 酶污染。建议戴一次性口罩操作。
5、Trizol 含有毒物质苯酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触 Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。
6、为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。
TRIzol 试剂分为若干即用型形式。个别产品还可量身定制，用于从不同的生物来源（包括人类、动物、植物、酵母、细菌和病毒）的样品中分离总 RNA 或同时分离 RNA、DNA 和蛋白质。
原始样品类型：细菌，血液，细胞，植物样本，组织，病毒样本，酵母
描述 从组织和细胞中分离总 RNA，包括富含脂肪组织和难提取样品。
终产物：总 RNA，转录组 RNA，MicroRNA
纯化时间：1 小时
应用：克隆，Northern Blotting，核酸酶保护实验，实时荧光定量 PCR (qPCR)，逆转录 PCR (RT-PCR)），cDNA 文库构建
操作方法：
1、细胞裂解：
组织样本： Trizol用量：每 50-100 mg 组织加 1 ml Trizol，样品体积不应超过 Trizol 体积的 10％。
（1）将动物或植物组织切成小块，在液氮中磨碎或用匀浆器匀浆处理。
（2）将研磨好的组织粉末快速转入装有 1 ml Trizol 的 2 ml 离心管中，在涡旋振荡器上迅速振荡混匀，置于冰上， 待所有的样品研磨完。
（3）裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。对于富含蛋白、脂肪或多糖物质的组织样品如肌肉、脂肪组织和植物结节部位等，匀浆后仍会存留有不溶物质，可于 4℃ 12,000 x g 离心 10 min，然后吸取上清至一新的离心管中。
细胞样本：
（1）贴壁细胞：吸尽培养液，每 10 cm2培养面积（6 孔板单孔或 35 mm 平皿）加入 1 ml Trizol，用加样器吹打数次，以确保细胞完全裂解，然后转移至离心管中。 注：Trizol 的使用量应由培养皿表面 积决定，而非由细胞数目决定。Trizol 量不足可能导致提取的 RNA 中有 DNA 污 染 。
（2）悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，每 5-10×106动植物或酵母细胞，或每 1×107细菌细胞加入 1ml Trizol， 用加样器吹打，使其完全裂解，然后转移至离心管中。 注：添加 Trizol 前切勿洗涤细胞 ，以免 RNA 降解。必要时可以用匀浆器来裂解某些细菌或者酵母细胞 。
2、液相分离：
（1）裂解产物于室温放置 5 min，使核酸-蛋白复合物完全分离。（注：此时样品可在-80℃长期保存。 ）
（2）每 1 ml Trizol 加入 0.2 ml 氯仿，盖紧管盖，剧烈振荡 15 s，室温放置 2-3 min。
（3）4℃ 12,000 x g 离心 15 min，样品会分成三层：桔黄色的下层有机相，中间层和无色的上层水相。
（4）吸取含总 RNA 的上层水相至一新的离心管中，吸取水相的体积为所用 Trizol 试剂的 60％。
3、RNA 回收
（1）按照每 1 ml Trizol 的最初使用量加入 0.5 ml 异丙醇，颠倒数次混匀，室温放置 10 min。
（2） 4℃ 12,000 x g 离心 10 min，弃除上清，可见胶状的 RNA 沉淀。
（3）按照每 1 ml Trizol 的最初使用量加入 1 ml 75%乙醇，颠倒数次混匀，洗涤沉淀。
（4）4℃ 12,000 x g 离心 5 min，弃除上清。
（5）室温倒置 5-10 min 晾干或真空抽干（不要使用真空干燥离心机，以免 RNA 过干，难以溶解）。
（6）加入适量（如 25ul） DEPC-ddH2O 或 TE 缓冲液，用加样器吹打数次溶解 RNA。
（7）通过 RNA 电泳以及紫外分光光度计检测，确定 RNA 的浓度、纯度和完整性。
（8）所得的 RNA 应立即使用或适量分装后-80℃保存，避免反复冻融。
注意事项：
1、如果需要测量 RNA 的 A260/A280 的比值，建议使用 RNA 定量缓冲液对样品稀释后，进行测量。
2、所有离心管，枪头及相关溶液都必须无 RNA 酶污染。耐高温器物可 180℃烘烤 4 小时以去除RNA 酶，其它器物去除 RNA 酶可考虑用 0.01%的 DEPC 水浸泡过夜，然后灭菌，烘干。溶液需用 DEPC 水配制。加 0.01% DEPC 至重蒸水或 MiliQ 级水中，处理过夜，灭菌即成 DEPC 水。
3、使用冻存的细胞或组织抽提总 RNA 的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的 RNase 会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽 RNA， 推荐先加入适量 Trizol，并裂解样品后冻存。
4、必须戴一次性手套操作，且尽量不要对着 RNA 样品呼气或说话，以防 RNA 酶污染。建议戴一次性口罩操作。
5、Trizol 含有毒物质苯酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触 Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。
6、为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。
公司简介
上海中晓生物科技有限公司成立于2010年，为生命科学研究领域提供高品质的产品与服务，重点关注蛋白质结构学与细胞培养学领域，一级代理引进了一批国外优秀的产品，并自主研发了一批可以进口替代的民族品牌产品。公司总部设在上海，在北京、广州、青岛、武汉、成都均有办事处，与精选契合的合作伙伴一起为广大生命科学研究人员服务。公司主营产品走精品路线，均为现货。诚信为本、承诺必达，希望能与广大用户精诚合作，双赢共进。
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