外泌体快速荧光标记试剂盒
操作快速:一次全反应仅需20分钟
过程便捷:无需大型仪器,一般实验室均可满足
标记效率高:10μg外泌体标记效率大于90%
纯化效果好:有效去除90%以上游离荧光
回收率高:10μg外泌体回收率大于70%
| 试剂盒实测数据
荧光分光光度计检测经过荧光吸附柱(试剂盒中提供)前后的荧光染料,结果显示荧光吸附柱纯化后的染料相对荧光单位显著下降。表明荧光吸附柱可有效去除游离荧光(图1)。
图1 荧光吸附柱去除游离荧光测试
取5μg ,10μg尿液外泌体分别进行3次荧光标记,经纳米流式NanoFCM检测,标记效率均大于90%,且具有良好的重复性(图2)(注意:不同起始量的不同来源外泌体的标记效率以实际标记结果为准)。
图2 外泌体标记效率测试
取5μg ,10μg尿液外泌体分别进行3次荧光标记(绿色)重复实验,纯化后的外泌体,经qNano(TRPS外泌体计数技术)计数检测,标记后的外泌体的回收率均大于70%,且具有较好的重复性(图3)(注意:不同起始量的不同来源外泌体的回收效率以实际回收结果为准)。
图3 荧光标记外泌体的纯化回收率测试
终浓度5μg/ml PKH67荧光标记的尿液外泌体与Raw264.7细胞共孵育0h、4h、24h,流式细胞仪检测结果显示荧光信号逐渐增强,说明吞噬外泌体的细胞数量随着孵育时间的延长而增加(图4)。
图4 流式检测细胞吞噬荧光标记纯化的外泌体
终浓度36μg/ml 红色荧光标记的HeLa细胞外泌体,与3T3细胞共孵育24h,细胞骨架和细胞核分别用鬼笔环肽和 DAPI 标记,激光共聚焦显微镜扫描结果表明:标记的外泌体 (红) 定位于3T3细胞核周区域,证实了外泌体被内化。
图5 共聚焦显微镜观察细胞吞噬荧光标记纯化的外泌体(400×)
上海华盈生物医药科技有限公司 位于上海闵行区绿洲环路396弄5幢4层,是医学生物技术领域的特色高科技企业。2012年3月,华盈生物由原生物芯片上海国家工程研究中心副主任即技术平台建设主要负责人张庆华博士发起创建。张庆华博士是国家生物芯片标准化委员会等多个国家级学会的委员,承担和参与了国家重大科技专项、“863”、“973”、自然科学基金等多个科研项目,被多所重点高校聘为博士生导师,并享受国务院特殊津贴。
华盈生物以科学和专业为服务理念,视人才队伍为企业生命,汇聚了多名多年从事基因组学与系统生物学研究的高层次研究人员。公司团队中 30% 成员具有博士学历,40% 成员具有硕士学历,30% 成员具有大学本科学历,是一支名副其实的高学历科技人才队伍。严谨、严格、创新和求真务实的工作作风贯彻公司上下。
华盈生物以蛋白与抗体芯片的技术研发与推广为核心,与美国 Full Moon、RayBiotech、CDI 等国际专业公司结成战略伙伴,与美国John Hopkins大学、上海交通大学、复旦大学等知名院校展开紧密合作。引进和开发了丰富的蛋白芯片与抗体芯片技术平台,提供信号通路蛋白质磷酸化、胞内蛋白质表达、细胞因子表达、蛋白质相互作用、血清抗体谱筛选等多项蛋白水平组学技术服务项目。同时,公司充分发挥核心团队系统生物学研究背景优势,积极发展基因表达谱芯片、microRNA芯片、LncRNA芯片、PCR Array等多项基因水平研究技术服务,力求通过强大的数据挖掘与分析延伸服务打造出一个立体的组学科研技术服务体系,实现广大科研工作者“一站式”科研服务的愿望。
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