产品信息
货号 |
名称 |
规格 |
价格/元 |
M4410 |
超快转膜缓冲液(20x) |
500ML |
300 |
产品简介
超快转膜液使用独特配方,能高效超快地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。湿转法(Tank blot)或半干转法(Semi-dry blot)都可以使用。 
产品特点:
超快和环保:能在15-35分钟内完成转膜过程。超快转膜液不使用甲醇,减轻了对实验者和环境的伤害。
兼容性好:超快转膜液能兼容Laemmli胶,预制胶,Bis-Tris胶等多种凝胶。
转移效率高:超快转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有保存与运输方法
使用说明
转膜前准备:5-6张裁好的滤纸:裁好的转印膜;足够的1×超快转移buffer。
一、湿转法(Tank blot)
1、配制1×超快转膜液
1升1×Western超快转膜液:取50ml 20×超快转膜液,胶乳750ml双蒸水,混匀后胶乳200ml甲醇,混匀即可,现配现用,配好后置于冰上存放)。
2、将滤纸和海绵浸泡在1×超快转膜液中,完全浸湿。
3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×超快转膜液中(注意:在使用6%或8%分离胶转移大分子蛋白时,应该降低甲醇含量至10%,以获得更好转移效果)。
按照以下顺序做好转印三明治结构。
一、半干转(Semi-dry blot)
1、按照下表配制1×超快转膜液
2、将滤纸浸泡在1×超快转膜液中,完全浸湿。
3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×超快
转膜液中。
注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4、按照以下顺序做好转印三明治结构。
半干转时,滤纸、胶、膜之间的大小,一般是下层滤纸≥膜大于等于胶≥上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触;滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。
注意:PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿30秒。
三、转移条件
1、湿转
推荐使用恒流转移,电流可设置350-400mA,转膜液中离子成分较多,可以承受大电流,并且发热量较低。
注:不推荐使用恒压转移,因转膜液中离子成分较多,当电压在100v左右时,电流会达到400mA,此时已达到普通电泳仪器zui大电流,随着时间延长,可能无法达到稳定的100v电压。
2、半干转
保存:常温保存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。