生化试剂

β-伴大豆球蛋白ELISA试剂盒如何使用?

基本信息
产品名称:
β-伴大豆球蛋白ELISA试剂盒如何使用?
英文名称:
Elisa Kit
国产/进口:
国产
产地/品牌:
雅吉/GTX
型号:
48T/96T
参考报价:
总点击数:
191
更新日期:
2025-06-03
产品类别:

性能参数

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:                                                         96T

1.2 μg/ml -45μg/ml

 

使用目的:

本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)含量

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)水平。用纯化的β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin),再与HRP标记的β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品(80μg/ml

0.5ml×1瓶

3

标包被

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张  

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

标本要求 

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

40 μg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

20 μg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

10 μg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

5 μg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

2.5 μg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

 

  1. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

  2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

  3. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

  4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

  5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外

  6. 温育:操作同3。

  7. 洗涤:操作同5。

  8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

  9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

  10. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    操作程序总结:

     

     

    计算

      以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

    注意事项

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  11. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  12. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    保存条件及有效期

    1.试剂盒保存:;2-8

    2.有效期:6个月

公司简介
       上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学,通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户的厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉,为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到,公司总投资超过2000万元,并先后引进了自动化设备,组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统,为生产高质量的产品提供了有效保证。
     雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员的好评,先后在权威杂志文章中被引用。
 
上海雅吉生物科技有限公司以极强的职业精神,积极、负责、坦诚的服务令我们的客户满意! 
客户服务承诺
    以“服务、客户、技术”为根本。客户是我们的核心,坚持以高质量的产品服务客户, 秉持诚信原则,重视客户的意见与感受;我们愿意为大家提供良好的售后服务。希望老师们对我们的服务及工作提出意见,您的满意是我们工作的动力,祝广大师生客户生活工作愉快!
更多产品详情可查询官网:www.yajimall.com

售后服务
试剂盒售后:本公司出售的试剂盒均保质保量,质量问题均可免费退换,另提供免费代测服务。 细胞售后: 1. 细胞运输丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 3. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,未告知的视为产品合格。4-10天内出现问题,请提供细胞照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟我公司人员及时沟通判定是否重发,具体可以参照我官网或者随货说明书相关售后条款。
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