Cat No. ES-98
人胚胎祖细胞株E15克隆来源于已注册的亲代人胚胎干细胞系ACT03(MA03) (West et al,2008)。它表达标志物裸露角质层同源1基因(NNAT,neuronatin)( Wijnholds J.et al,1995),锚定相关蛋白-1(adherens junctions asso-ciated protein 1,AJAP1), 钙粘蛋白CDH18,电压门控钾通道亚基KCNS2,神经营养因子信号传导通路中的对接蛋白5(DOK5),在唐氏综合征表现的转录因子专一同源2(SIM2)(Rachidi et al, 2005),远端HOX基因表达HOXA2,B2。在分化试剂ES-K42分化后,这株细胞表现出很强的成软骨标识,其包括:Ⅱ型胶原-α1(CO-L2A1),软骨酸性蛋白-1(CRTAC1),白血球细胞衍生化学趋向素-1(LECT1),和软骨基质-4(MATN4),然而缺少肥大软骨细胞的标识IHH( Indian hedgehog homolog)和骨髓间充质干细胞的标识CD74。
阳性mRNA标记:NNAT, AJAP1, CDH18,KCNS2,DOK5,SIM2
产品信息
来源: 人胚胎祖细胞株E15克隆来源于亲代人胚胎干细胞系ACT03(MA03)(West,M.D.et al,2008)
应用范围:软骨
细胞数:每管含有>500,000细胞, 冷冻保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推荐生长培养基:ES-NC002
推荐培养环境:细胞应培养在有0.1%明胶涂层的组织培养级别的聚苯乙烯的培养皿上。快速融解,随后用培养基缓慢稀释,细胞最初的接种密度应该是大约20,000细胞/cm2。细胞应培养在37℃的5%CO2和5%O2可增湿培养箱中,培养基每周至少更换两次。对常规的培养,在细胞长汇合后,按1:3的比例进行传代。
注意:生长汇合后超过两天,不传代将会导致细胞的终末分化。
可用分化培养基:
分化培养基: Cat No. ES-K42
细胞群体倍增时间:大约50个小时
细胞群体倍增:细胞株E15在13代出售(最初从长汇合1.9cm2细胞培养皿中分离出的克隆设为P1),以1.9cm2细胞培养皿记,其对应大约16.5倍增,以原始的培养记,其对应大约33倍增。在体外,这株细胞有有限的细胞周期,在大约80个细胞群体倍增时停止生长。在正确的使用情况下,这株细胞可以扩增至少10个群体倍增。
质量控制:
无菌试验:HIV(1,2)、HBV、HCV、细菌、支原体和真菌检测为阴性。
冷冻复苏测试结果:>50% 细胞活性,>25%的附着性,具有生长汇合性,保持原始的细胞形态。
分析证明:请询要
使用限制:这些细胞只能做研究使用。不能人用, 也不能以商业的目的使用。获得该细胞株后,用户确保正确使用和操作。
参考:
Rachidi M, Lopes C, Charron G, Delezoide AL, Paly E, Bloch B, Delabar JM. 2005. Spatial and temporal localization during embryonic and fetal human development of the transcription factor SIM2 in brain regions altered in Down syndrome. Int J Dev Neurosci. 23(5):475-84.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
Wijnholds J, Chowdhury K, Wehr R, Gruss P. 1995. Segment-specific expression of the neuronatin gene during early hindbrain development. Dev Biol. 171(1):73-84.