Tozasertib | 陶扎色替

MCE 国际站：Tozasertib

中文名：陶扎色替

CAS：639089-54-6

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：4°C, protect from light

生物活性：Tozasertib (VX 680; MK-0457) 是一种 Aurora A/B/C 激酶 抑制剂，K_i 分别为 0.6、18、分别为 4.6 纳米。 IC50 和目标：Ki：0.6 nM (Aurora A)、18 nM (Aurora B)、4.6 nM (Aurora C)^[1] 体外：< /i> Tozasertib 诱导相似的细胞毒性，IC₅₀ 约为 300 nM，并在转染 ABL 或 FLT-3 的 BaF3 细胞中表现出 G2/M 停滞、核内复制和细胞凋亡的 AUR B 样抑制表型（突变型和野生型）激酶。 Tozasertib 以时间依赖性方式防止 CAL-62 增殖。 Tozasertib 处理 14 天后，8305C 的菌落数量和大小显着降低了约 70%，CAL-62、8505C 和 BHT-101 的菌落数量和大小降低了 90%。 Tozasertib 处理不同的 ATC 细胞可抑制增殖，IC₅₀ 在 25 和 150 nM 之间。 Tozasertib 显着削弱不同细胞系在软琼脂中形成菌落的能力。 caspase-3 活性分析表明 Tozasertib 在不同细胞系中诱导细胞凋亡。暴露于 Tozasertib 12 小时的 CAL-62 细胞显示 DNA 含量≥ 4N 的细胞积累。延时分析表明，经 Tozasertib 处理的 CAL-62 细胞在不分裂的情况下退出中期。此外，在 Tozasertib 治疗后组蛋白 H3 磷酸化被废除^[2]。?Tozasertib 对患者来源样本中携带 T315I 突变的 BCR-Abl 具有显着抑制活性^[3] .

体外：Tozasertib 诱导相似的细胞毒性，IC₅₀ 约为 300 nM，并在转染 ABL 或 FLT-3 的 BaF3 细胞（突变体和野生型）中表现出 G2/M 停滞、核内复制和细胞凋亡的 AUR B 样抑制表型型）激酶。 Tozasertib 以时间依赖性方式防止 CAL-62 增殖。 Tozasertib 处理 14 天后，8305C 的菌落数量和大小显着降低了约 70%，CAL-62、8505C 和 BHT-101 的菌落数量和大小降低了 90%。 Tozasertib 处理不同的 ATC 细胞可抑制增殖，IC₅₀ 在 25 和 150 nM 之间。 Tozasertib 显着削弱不同细胞系在软琼脂中形成菌落的能力。 caspase-3 活性分析表明 Tozasertib 在不同细胞系中诱导细胞凋亡。暴露于 Tozasertib 12 小时的 CAL-62 细胞显示 DNA 含量≥ 4N 的细胞积累。延时分析表明，经 Tozasertib 处理的 CAL-62 细胞在不分裂的情况下退出中期。此外，组蛋白 H3 磷酸化在 Tozasertib 处理后被废除^[2]。 Tozasertib 对患者来源样本中携带 T315I 突变的 BCR-Abl 具有显着抑制活性^[3]。

激酶试验：ATP 的消耗通过丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶对与 NADH 的氧化耦合，这可以通过 340 nm 处吸收的减少来监测。反应液含有 100 mM Tris (pH 8)、10 mM MgCl2、2.2 mM ATP、1 mM 磷酸烯醇丙酮酸、0.6 mg/mL NADH、75 单位/mL 丙酮酸激酶、105 单位/mL 乳酸脱氢酶和 0.5 mM 底物肽（序列： EAIYAPFAKKK）。通过添加足够的激酶使反应达到 30 nM 激酶浓度来开始反应 (75 μL)，并在微量滴定板分光光度计中在 30°C 下监测吸光度的降低超过 30 分钟。通过添加 3.75 μL Tozasertib 的 100% DMSO 溶液或单独的 DMSO 获得抑制常数。 Ki值计算如下，Ki=IC50/(1+[S]/Kd)，其中[S]=[ATP]=2.2mM，并且Kd(ATP相对于Abl)=70μM。这些值的计算假设野生型和 H396P Abl 激酶结构域的 Kd (ATP) 为 70 μM。

细胞试验：CAL-62 细胞在不存在（二甲基亚砜，DMSO）或存在 500 nM Tozasertib 的情况下培养不同的时间段（1-5 天）。通过用不同浓度的 Aurora 抑制剂 (5-500 nM) 处理不同的 ATC 细胞 4 天来评估 Tozasertib 对细胞增殖的剂量依赖性影响。在孵育时间结束前，用 30 mM BrdU 脉冲标记细胞 2 小时。使用细胞增殖 ELISA 试剂盒通过比色免疫测定法分析 BrdU 掺入情况。将 Tozasertib 处理的细胞的结果与对照细胞中观察到的结果进行比较，并表示为相对于对照的变异倍数。

动物体内实验:对于 HL-60 研究，雌性无胸腺 NCr-nu 小鼠皮下接种 107 个 HL-60(TB) 白血病细胞到右腋窝区域。肿瘤达到 150200 mm3 后，进行同上治疗。 Tozasertib 在 50 mM 磷酸盐缓冲液中的 50% PEG 300 载体中制备。顺铂配制在盐水中，通过 ipq4.d 给药。总共注射 3 次，剂量为 5.4 mg/kg。对于 MIA PaCa-2 研究，雌性 MF1 裸鼠的背侧接种了 107 个 MIA PaCa-2 细胞。当肿瘤达到 175 mm3 后，进行同上治疗。 Tozasertib 在 50 mM 磷酸盐缓冲液中的 50% PEG 300 载体中制备。 5-氟尿嘧啶，配制在盐水中，通过 ivq4.d 施用。剂量为50毫克/公斤。对于 HCT116 研究，雌性 Hsd RH rnu/nu 大鼠在右侧腹部接种 107 个 HCT116 细胞。一旦肿瘤达到 700950 mm3，就进行治疗。 Tozasertib 通过留置股动脉导管连续给药，然后输注盐水 4 天，然后重复剂量周期。对于所有研究，每周三次通过卡尺测量来确定肿瘤体积。

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研究领域：Cell Cycle/DNA Damage  |  Epigenetics  |  Autophagy

作用靶点：Aurora Kinase  |  Autophagy

热门产品线：重组蛋白  |  化合物库  |  天然产物  |  荧光染料  |  PROTAC  |  同位素标记物  |  寡核苷酸

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

参考文献：

[1]. Harrington EA, et al. VX-680, a potent and selective smallmolecule inhibitor of the Aurora kinases, suppresses tumor growth in vivo. Nat Med. 2004; 10:262-7.[2]. Salah E, et al. Crystal structures of ABL-related gene (ABL2) in complex with imatinib, tozasertib (VX-680), and a type I inhibitor of the triazole carbothioamide class.J Med Chem. 2011 Apr 14;54(7):2359-67. Epub 2011 Mar 18.[3]. Arlot-Bonnemains Y, et al. Effects of the Aurora kinase inhibitor VX-680 on anaplastic thyroid cancer-derived cell lines. Endocr Relat Cancer. 2008 Jun;15(2):559-68