The optimum density gradient medium/最佳密度梯度介质

OptiPrep 是一种无菌且经过内毒素测试的 60%iodixanol(碘克沙醇，碘二醇，碘乙醇)水溶液，密度为 1.320 g/ml。 碘克沙醇是作为 X 射线造影剂开发的，因此经过了严格的临床测试。 它是非离子的，对细胞无毒且代谢惰性。 碘克沙醇溶液可以在所有有用的密度下制成等渗，这种溶液具有低粘度和渗透压。

Sigma/默克公司的OptiPrep™ Density Gradient Medium/OptiPrep™密度梯度培养基(货号D1556，包装规格：250ml)，在Sigma网站对应产品页面靠下的部分可以看到“法律信息 OptiPrep is a trademark of Serumwerk Bernburg AG”)。加拿大Stemcell公司的OptiPrep™(货号07820，包装规格：250ml)，在其产品说明书里面，也可以看到“OptiPrep is a trademark of Serumwerk Bernburg”。

OptiPrep 的高密度有助于通过连续或不连续梯度或通过简单的密度屏障从密集负载区浮选来分离细胞。

51个用于细胞分离的实验方案

OptiPrep能提高细胞器的分辨率。 低粘度、等渗梯度可在预先形成的梯度中快速有效地分离主要细胞器。

64个用于分离亚细胞器和膜的实验方案

OptiPrep 是病毒纯化的理想密度梯度介质^[1]，使用 OptiPrep梯度纯化的病毒显示出感染性：粒子数比率至少是 CsCl 梯度的 100 倍。

在基因治疗中，用作载体的重组腺相关病毒rAAV(recombinant adenoassociated virus)的密度梯度离心纯化^[2]，几乎都用的是OptiPrep介质。目前检索到的，rAAV研究使用OptiPrep的文献数量已超过了1200篇^[3,4]。

38个用于分离病毒的实验方案

13个用于分离大分子和脂蛋白纯化的实验方案

技术参数：

主要成分：碘克沙醇/Iodixanol  60%（w/v）CAS号：92339-11-2

密度（Density）：1.320 ± 0.001 克/毫升

渗透压： ~170 mOsm

内毒素： < 1.0 EU/ml

应用：

1. 膜运输和细胞信号分析
2. 胞吞作用和胞吐作用分析
3. 哺乳动物和非哺乳动物细胞纯化；在没有中性粒细胞污染的情况下，常规实现非人类淋巴细胞的最大产量
4. 哺乳动物和非哺乳动物细胞器纯化
5. 质膜和域纯化
6. 膜囊泡和细胞质纯化
7. 病毒纯化
8. 血浆脂蛋白纯化
9. 蛋白质和蛋白质复合物纯化
10. 质粒DNA纯化
11. 核糖核蛋白纯化

特性：

1. 作为 X 射线造影剂开发，因此经过严格的临床测试。
2. 非离子
3. 对细胞无毒
4. 代谢惰性。

在生物学和物理化学上与 Nycodenz® 非常相似，但有一些主要区别：

1. 在结构上，Nycodenz® 的近似二聚体
2. 渗透压约为相同密度 Nycodenz® 溶液的一半
3. 可以在所有密度下制成等渗
4. 可以直接添加到细胞或细胞器悬浮液中，而不会改变其渗透压，促进浮选梯度的纯化
5. 由于更高的分子量，比 Nycodenz® 更快地形成自生梯度
6. 梯度纯化的哺乳动物和非哺乳动物细胞的高生存力
7. 使用预先形成的或自生成的梯度进行有效的细胞器和膜囊泡分离
8. 病毒传染性至少比 CsCl 梯度高 100 倍
9. 比蔗糖或甘油梯度更好地保存蛋白质-蛋白质和蛋白质-核酸复合物
10. 在 4 小时内以自生梯度分析血浆脂蛋白
11. 内毒素水平不太保证低于 1.0 EU/ml（由鲎变形细胞裂解物 (LAL) 测试确定）；然而，我们的目标是生产内毒素水平低于或等于 0.13 EU/ml 的批次。每批的实际密度和内毒素水平值在提供的分析证书中指定。
12. 根据 Ph. Eur 声称无菌。
13. 1. 制造、包装和发布符合：
    2. 当前欧盟良好生产规范指南
    3. Fresenius Kabi AS 质量体系
    4. Fresenius Kabi AS 制造许可证

注意事项

1. Optiprep的保质期为3年。储存温度为4度-24度，避光。使用前将瓶子倒转数次以混合内容物。
2. 详细使用方法请参见说明书或来电咨询。

1. OptiPrep™——The ideal density gradient medium for purification and analysis of viruses
2. AAV Purification by Iodixanol Gradient Ultracentrifugation/用碘克沙醇密度梯度离心纯化AAV病毒
3. OptiPrep™ Reference List RV02-1  
4. OptiPrep™ Reference List RV02-2

1. AAV病毒纯化
   1. Zolotukhin, S., Byrne, B., Mason, E. et al. Recombinant adeno-associated virus purification using novel methods improves infectious titer and yield. Gene Ther 6, 973–985 (1999). https://doi.org/10.1038/sj.gt.3300938
2. 肝星状细胞分离
   1. Mederacke, I., Dapito, D. H., Affo, S., Uchinami, H. and Schwabe, R. F. (2015). High-yield and high-purity isolation of hepatic stellate cells from normal and fibrotic mouse livers. Nat Protoc 10(2): 305-315.