细胞房孵箱的生物性污染会严重影响细胞培养的结果,以下是快速有效处理细胞房孵箱生物性污染的方法:
一、确定污染类型
首先,通过观察细胞生长状态、培养液的变化等初步判断污染类型。比如:
细菌污染:培养液变浑浊,细胞生长受抑制甚至崩解死亡。在普通倒置显微镜下呈黑色和细砂状。
霉菌污染:培养液中有白色或浅黄色漂浮物,显微镜下可见细丝状和团块状漂浮物。
黑胶虫污染:细胞状态差,黑点和碎片多,布朗运动,镜下无法直接观察到具体形态。
支原体污染:显微镜下无可见迹象,不引起培养液浑浊和 pH 改变,传统微生物培养法难检测,多数抗生素无效。
真菌污染:呈链球状或丝状,有肉眼可见菌落,培养基颜色可能变化,仅局部影响细胞生长,会形成孢子易污染其他细胞。
二、停止使用并清理孵箱
取出所有物品
立即停止使用被污染的孵箱,小心地将孵箱内的细胞培养瓶、培养皿等物品取出,放入专门的污染物品处理区域,避免污染扩散。
清洁孵箱内部
先用温和的清洁剂擦拭孵箱内壁、搁板、托盘等部位,去除污垢和残留的培养液。
针对不同污染类型选择合适的消毒剂进行消毒。例如,对于细菌污染可使用含氯消毒剂;对于真菌污染可使用抗真菌试剂等。确保消毒剂能够覆盖到孵箱的所有角落,包括缝隙和难以到达的部位。对于顽固性污染,可以考虑使用专业的杀孢子剂。
清洁孵箱外部
用清洁剂和消毒剂对孵箱外部表面进行清洁,特别是控制面板、门把手等经常接触的部位。
三、更换关键部件
过滤器
检查孵箱的空气过滤器,若被污染或堵塞,应及时更换新的过滤器,以确保过滤空气中的微生物,防止再次污染。
水盘
取出孵箱内的水盘,清洗干净后用消毒剂进行消毒或直接更换新的水盘,因为水盘可能滋生细菌和真菌。
四、检测与验证
微生物检测
在清洁和消毒孵箱后,进行微生物检测,如采集孵箱内的空气样本、表面擦拭样本等进行检测,以确定孵箱是否达到无菌状态。
细胞培养验证
将一些未受污染的细胞放入经过处理的孵箱中进行培养,观察细胞的生长状态。若细胞生长正常,没有出现污染迹象,则说明孵箱处理成功。
五、预防再次污染
规范操作
加强操作人员的培训,严格遵守无菌操作规范。在放入和取出细胞培养物品时,动作要迅速、准确,避免污染孵箱内部环境。
定期清洁和消毒
建立定期清洁和消毒孵箱的制度,根据实际使用情况确定清洁和消毒的频率。一般每周至少进行一次全面清洁和消毒。
监测环境
定期监测细胞房的环境,包括空气质量、温度、湿度等参数。确保环境符合细胞培养的要求,减少污染的风险。
使用无菌物品
确保放入孵箱的细胞培养物品都是无菌的,如培养液、血清、培养瓶等。在使用前要进行严格的检查和消毒处理。
此外,对于细胞房孵箱的生物性污染处理,还可以考虑使用专业的消毒设备,如润联旗下的欧菲姆 KVBOX 灭菌仪。该灭菌仪将过氧化氢液体雾化成 5 微米左右的干雾颗粒扩散出来,弥漫在培养箱里面,对舱体内部达到灭菌效果,操作非常简便,适合密闭舱体内部消毒。欧菲姆KV-BOX过氧化氢消毒机详询润联李工17391794799!