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Trizol Reagent
　　简介:TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。
　　TRIzol在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性，因此对纯化DNA及标准化RNA的生产十分有用。
　　
TRIzol的成分:
　　TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中还加入了8－羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase（RNA酶）。
　　※0.1%的8－羟基喹啉可以抑制RNase，与氯仿联合使用可增强抑制作用。
　　※异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失，导致细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。
　　※β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。
TRIzol的使用方法:
　　用匀浆器将组织磨碎，加入TRIzol处理组织。5分钟后加入氯仿，以每分钟12000转离心5分钟，样品即分成水样层、中间层和有机层。
　　※RNA存在于水样层中，收集水样层后可以通过异丙醇沉淀RNA来还原。
　　※在除去水样层后，有机层中的DNA和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原：乙醇能使中间层的DNA沉淀析出，在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。
　　每100ml TRIzol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。无论样品是人、动物、植物还是细菌组织，该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(约五百万个)及大量的组织(≥1g)和细胞(超过一千万个)均有较好的分离效果。
　　每一百万细胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA，每毫克组织用TRIzol抽提可得1-10微克RNA（产量因细胞和组织不同而异）。
　　TRIzol操作上的简便性允许其同时处理多个样品，所有的操作可以在一小时内完成。
　　TRIzol抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白质的污染，故而能够作RNA 印迹分析、斑点杂交、poly(A)+ 选择、体外翻译、RNA酶保护分析和单分子克隆（PCR）。
　　※如果是用于PCR，当两条引物位于单一外显子内时，建议用级联扩大的DNase I(Cat. No. 18068)来处理抽提的总RNA。
　　※TRIzol试剂能促进不同种属、不同分子量大小的多种RNA的析出。例如，从大鼠肝脏抽提的RNA经过琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色，可见许多介于7kb和15kb之间的不连续的高分子量条带（mRNA和hnRNA成分），两条优势核糖体RNA条带位于~5 kb (28S)和~2 kb (18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时，其A260/A280比值≥1.8。抽提小RNA时宜-70℃沉淀过夜。
　　TRIzol对人体有害，使用时应戴一次性手套，注意防止溅出。
Invitrogen相关资料:
Invitrogen一步法总RNA提取试剂/Trizol Reagent
使用Invitrogen公司的TRizol试剂，可快速简单地获得高纯度总RNA。
Invitrogen公司的一步法总RNA提取试剂TRIZOL比其他纯化方法可提高产率30%-150%。这种TRIZOL试剂的酚和异硫氰酸胍的均相溶液可直接用于从人类、动物、植物、细菌等的细胞或组织中提取总RNA、DNA或蛋白质。
TRIZOL试剂纯化的RNA可用于PCR、RNA印迹分析、poly(A)+筛选或斑点杂交。纯化的DNA和蛋白质分别适用于DNA和蛋白质印迹分析。
◆ 获得高纯度RNA（A260/A280>1.9）
◆ 在1小时内分离RNA；在3小时内分离DNA或蛋白质
◆ 鲜明的红色染料使去除含RNA的液相简单便捷
◆ 无论是小量的细胞（5×106）或组织（50-100mg）还是大量的细胞（107）或组织（>1g）都可得到出色的结果
◆ 在4℃条件下可稳定保存两年以上
◆ 可使用TRIZOL用于组织或细胞；使用TRIZOL LS用于血液或其他液体样品
品名: TRIzol Reagent
Cat. No. 15596-026
TRIzol? Reagents are ready-to-use, monophasic solutions of phenol and guanidine isothiocyanate suitable for isolating total RNA, DNA, and proteins (1-6). Isolation procedures are based upon improvements to the single-step RNA isolation method
General Specifications
Brand TRIzol?
Final Product Transcriptome RNA
micro RNA
Total RNA
High Throughput Compatibility Manual Protocols
Isolation Technology Organic Extraction
Number of Reactions 100 Preps
Product Size 100 ml
Purification Time 1 hr
Quantity 1
Sample Type (General) Viral Samples
Plant Samples
Tissue
Blood
Bacteria
Yeast
Cells
Scale Scaleable
Starting Material (Cell #) Up to 1g Tissue, Up to 1 x 10^7 cells
System TRIzol
Yield (up to) 8 mg
Top Contents & Storage:
TRIzol? and TRIzol? LS Reagents include the indicated amount of reagent. The TRIzol? Max? Bacterial RNA Isolation Kit contains TRIzol? Reagent and Max Bacterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.