简介:
L-岩藻糖是一种6碳脱氧己糖,存在于自然界的各种生物生态位中。L-岩藻糖的主要天然来源是褐藻多糖岩藻依聚糖。
L-岩藻糖是植物细胞壁多糖中的一种次要成分,特别是参与植物细胞伸长的鼠李糖醛酸、木葡聚糖和阿拉伯半乳聚糖蛋白。
在糖蛋白中,L-岩藻糖是寡糖部分的关键成分,通过α-1、(2、3、4或6)键连接。已知寡糖结构的变化决定了糖蛋白的生物功能,因此,L-岩藻糖已被认为是各种疾病状态(如乳腺癌症)的潜在生物标志物。L-岩藻糖是母乳低聚糖(HMO)的常见成分,如2'-岩藻糖基乳糖。除了作为益生元的作用外,HMO还可以为母乳喂养的婴儿赋予免疫功能,例如防止微生物粘附到肠粘膜上。
该试剂盒(K-FUCOSE)提供了一种快速可靠的方法,适用于测量植物提取物、生物样品和其他材料中的L-岩藻糖。它也可用于测量不作用于显色底物的α-L-岩藻糖苷酶。
原理:
L-岩藻糖在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)存在下被L-岩藻糖脱氢酶氧化为L-岩藻酮-1,5-内酯,形成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)(1)。
(L-岩藻糖脱氢酶)
(1) L-岩藻糖+NADP+——>L-岩藻酮-1,5-内酯+NADPH+H+
在该反应中形成的NADPH的量与L-岩藻糖的量是化学计量的。NADPH是通过340nm处吸光度的增加来测量的。
套件:
手动格式进行100次测定(或自动分析仪格式进行1020次测定或微孔板格式进行1000次测定)的试剂盒。试剂盒包含:
瓶1:缓冲液(44 mL;pH 9.5)加叠氮化钠(0.02%w/v)作为防腐剂。
在4°C下稳定2年以上。
瓶2: NADP+。冻干粉。在-10°C以下稳定5年以上。
瓶3: L-岩藻糖脱氢酶悬浮液(5.5 mL)。在-10°C以下稳定2年以上。
瓶4: L-岩藻糖标准溶液(5 mL,0.5 mg/mL)。稳定2年以上;在4°C下密封储存。
试剂溶液的制备(已提供):
1.使用随附的瓶子1中的内容物。
在4°C下稳定2年以上。
2.将瓶子2的内容物溶解在11毫升蒸馏水中。
在4°C下稳定约4周,或在-10°C以下稳定>2年(为避免重复的冻融循环,请分成适当大小的等分试样并储存在聚丙烯管中)。
3.使用提供的瓶子3中的内容物。在第一次打开之前,摇动瓶子以去除可能沉积在橡胶塞上的任何酶。随后将瓶子垂直存放。使用前,将瓶子旋转以混合内容物。
在-10°C以下稳定2年以上。
4.使用提供的瓶子4中的内容物。稳定2年以上;在4°C下密封储存。
注:L-岩藻糖标准溶液仅在对所用分光光度计的准确性有疑问或怀疑样品中的物质引起抑制的情况下进行测定。L-岩藻糖的浓度直接由NADPH的消光系数决定。
概要:
L-岩藻糖检测试剂盒是一种简单、快速、可靠的方法,用于测量和分析植物提取物、生物样本和其他材料中的L-岩藻酮糖。该试剂盒可用于测量不作用于显色底物的α-岩藻糖苷酶。
说明:如果所有体积减半,使用MegaQuantTM波分光光度计(D-MQWAVE)可使手动测试次数加倍。
规格:100次测定(手动)/1000次测定(微孔板)/1020次测定(自动分析仪)
运输温度:环境温度
储存温度:短期稳定性:2-8°C,
稳定性:在推荐的储存条件下>2年
分析物:L-岩藻糖
分析格式:分光光度计、微孔板、自动分析仪
检测方法:吸光度
波长(nm):340
信号响应:增加
线性范围:每次测定0.5至100µg L-岩藻糖
检测限:0.68mg/L
反应时间(分钟):~10分钟
应用实例:L-岩藻糖是岩藻依聚糖(一种海洋多糖)、食品、药品和其他材料(如生物样品等)中的主要成分。
方法识别:新方法