商品介绍：
产品概述
本试剂盒基于实时荧光PCR技术，用于快速、精准检测金鱼及鲤科鱼类样本中的GFHNV病毒核酸，适用于： ✔ 观赏鱼及养殖鱼类的疫病诊断
✔ 进出口检疫及病原监测
✔ 鱼苗场健康筛查
✔ 水体环境病毒污染评估
【产品名称】GFHNV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
【产品别名】金鱼造血器官坏死病毒（GFHNV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
【包装规格】 50T
【产品货号】YLS-P1680
【检测范围】2×10 3 ～1×10 8 /mL
【最低检测限】1×10 3 /mL
【产品方法】荧光PCR
 
检测原理‌
高保守靶标：靶向GFHNV 衣壳蛋白基因
.技术原理影响
恒温荧光法（如LAMP技术）通过特异性引物和探针靶向IHNV基因序列，在恒温条件下扩增并实时监测荧光信号，
其灵敏度与实时荧光定量PCR（qPCR）接近，但操作更简便。
荧光探针法的特异性受引物设计、探针结合效率及阈值设定影响，需通过严格验证确保低假阳性率
灵敏度与特异性数据
灵敏度：75%-98%（即真阳性率），可检出75-98%的实际阳性样本。
特异性：95%-99%（即真阴性率），可排除95%-99%的实际阴性样本。

‌操作步骤‌
一、样本处理
核酸提取
推荐使用磁珠法或离心柱法提取样本核酸，避免反复冻融导致降解。
提取后核酸需立即检测或-20℃短期保存（≤1周）。
二、试剂准备
试剂解冻
将试剂盒从-20℃取出，室温平衡10分钟，避免反复冻融。
反应体系配制
按说明书比例混合反应液（含dNTP、缓冲液）和酶液（Taq DNA聚合酶）。
每管加入5μL模板核酸，终体积20μL。
三、PCR扩增
仪器设置
使用ABI 7500、LightCycler等荧光定量PCR仪，设置基线循环6-15，阈值设为阴性对照信号10倍。
扩增程序
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40个循环）

操作流程‌

样本采集：规范采集鼻咽/咽拭子，置于病毒保存液。
核酸提取：采用磁珠法或柱提法提取RNA。
PCR扩增：加入荧光PCR反应体系，上机运行。
结果分析：根据扩增曲线和Ct值判定阴阳性（Ct值≤预设阈值为阳性）

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