简介：
在谷物发芽或制麦过程中，α-淀粉酶和β-淀粉酶在淀粉完全降解为可代谢或可发酵糖的过程中起着核心作用。已经开发了许多测量α-淀粉酶的方法，但唯一使用明确底物的方法是本文所述的Ceralpa®方法。β-淀粉酶通常使用淀粉作为底物的非特异性还原糖测定法进行测量。在某些方法中，α-淀粉酶首先通过在低pH值下处理而失活。
用于α-淀粉酶测定的Cerapha®程序在存在过量耐热α-葡萄糖苷酶（淀粉酶HR®试剂）的情况下，使用定义的低聚糖“非还原性末端封闭的对硝基苯麦芽七糖苷”（BPNPG7）作为底物。由于存在“阻断基团”，耐热α-葡萄糖苷酶对天然底物没有作用。在内切α-淀粉酶水解低聚糖时，混合物中过量的α-葡萄糖苷酶使对硝基苯麦芽糖片段瞬间定量水解为葡萄糖和游离对硝基苯酚。
套件：
进行50次α-淀粉酶和β-淀粉酶测定的试剂盒。试剂盒包含：
瓶1：Ceralpa®基材。阻断的对硝基苯基-α-D-麦芽七糖苷（BPNPG7）加上耐热的α-葡萄糖苷酶（125 U）和稳定剂。在-10°C以下稳定4年以上。
瓶2：Betamyl-3®基质。对硝基苯-β-D麦芽三糖苷（PNPβ-G3）加耐热β-葡萄糖苷酶（50U）和稳定剂。在-10°C以下稳定4年以上。
瓶3: Cerapha®缓冲液A.苹果酸钠/氯化钠（1 M）和氯化钙（40 mM）（50 mL，pH 5.4）加叠氮化钠（0.02%w/v）。在4°C下稳定约4年。
瓶4: Betamyl-3®缓冲液A.Tris/HCl缓冲液（25 mL，1 M，pH 8.0）加EDTA二钠（20 mM）和叠氮化钠（0.02%w/v）。在4°C下稳定约4年。
瓶5: Betamyl-3®缓冲液B.MES缓冲液（48 mL，1 M，pH 6.2）加EDTA二钠（20 mM）、BSA 10 mg/mL和叠氮化钠（0.09%w/v）。在4°C下稳定约4年。
瓶6：具有标准化α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的麦芽粉（如瓶子标签上所示）。稳定时间>4年；在室温下密封储存。
试剂溶液的制备：
1.将瓶子1的内容物溶解在10毫升煮沸并冷却的蒸馏水中。这是Ceralpa®基板解决方案。在使用之间，将其分成适当大小的等分试样，并储存在-10°C以下的聚丙烯管中。将未使用的试剂放在冰上等待使用。
2.将瓶子2的内容物溶解在10毫升煮沸并冷却的蒸馏水中。这是Betamyl-3®底物溶液。在使用之间，将其分成适当大小的等分试样，并储存在-10°C以下的聚丙烯管中。将未使用的试剂放在冰上等待使用。
小心不要混合Ceralpa®和Betamyl-3®基材。
3.稀释的Ceralpa®缓冲液A。使用前用蒸馏水将全部内容物（50 mL）（加上可能存在的结晶沉淀物）稀释至1000 mL。pH值应为5.4；必要时进行调整。
在4°C下稳定>12个月。
4.稀释的Betamyl-3®缓冲液A。用蒸馏水将2.5 mL瓶4的内容物稀释至50 mL。使用前，加入0.88 g半胱氨酸HCl（Megazyme目录号g-LCYST200）（半胱氨酸HCl的终浓度约为100 mM），并用4 M NaOH将pH值调节至8.0。
在4°C下稳定8小时。
在使用缓冲液之前，立即将半胱氨酸加入缓冲液A中（然后调节pH值）。半胱氨酸是提取未发芽谷物中存在的“不溶性”β-淀粉酶所必需的。根据Erdal（1993）和Santos和Riis（1996）的研究，该缓冲区已从我们最初的建议中改变。不添加半胱氨酸提取的酶称为“可溶性”β-淀粉酶；用半胱氨酸提取的是“总”β-淀粉酶
5.稀释的Betamyl-3®缓冲液B。用蒸馏水将瓶子5的全部内容物稀释至500毫升。
在4°C下稳定约1年。
6.使用随附的瓶子6中的内容物。稳定时间>4年；在室温下密封储存。
概要：
麦芽淀粉酶检测试剂盒适用于麦芽粉中α-淀粉酶和β-淀粉酶的特定测量和分析。
规格：每个试剂盒100次测定（每次50次）
运输温度：环境温度
储存温度：短期稳定性：2-8°C，
长期稳定性：见单个组件标签
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：α-淀粉酶、β-淀粉酶
检测形式：分光光度计
检测方法：吸光度
波长（nm）：400
信号响应：增加
检测限：0.05 U/mL
反应时间（min）：~20min（Ceralpa法），
                              ~10分钟（倍他美醇-3法）
应用实例：谷物粉、麦芽、发酵液等原料。
方法识别：

• “Ceralpha” 方法：美国谷物化学家协会方法（AACC Method 22-02.01）、美国分析化学家协会方法（AOAC Method 2002.01）、国际谷物科技协会标准（ICC Standard No. 303）、澳大利亚皇家化学研究所标准方法（RACI Standard Method）以及英国食品研究协会面粉检测工作组方法（CCFRA Flour Testing Working Group Method 0018）。
• “Betamyl-3” 方法：澳大利亚皇家化学研究所标准方法（RACI Standard Method）。