简介:
阿拉伯木聚糖是小麦和黑麦胚乳细胞壁的主要多糖。它在大多数高粘度的谷物溶液和浆料中都有很大比例的存在,在动物营养中,它会降低肠道对营养的吸收率。endo--D-木聚糖酶(木聚糖酶)被添加到饲料中以催化这种多糖的解聚。可以证明,在阿拉伯木聚糖骨架中,木聚糖酶每千个键中只有一个键的内切切割可以显著降低粘度特性。
在用作饲料补充剂的碳水化合物酶中,木聚糖酶是最难测量的酶之一。这些问题归因于几个因素,包括饲料中添加的酶水平低、制粒过程中酶的失活、酶与饲料成分的结合以及特定木聚糖酶抑制剂的存在。
唯一足够灵敏、特异和稳健的生化方法来测量饲料中的木聚糖酶是粘度测定法和使用染色木聚糖或阿拉伯木聚糖多糖的方法。粘度测定是单一的,而使用染色木聚糖底物的测定是快速、可重复且易于执行的。我们建议使用木聚糖AX片剂或偶氮小麦阿拉伯木聚糖(偶氮WAX)。基于Xylazyme AX的检测比使用偶氮WAX的检测灵敏约5倍。然而,后一种底物在大多数应用中确实具有足够的灵敏度,并且结果的可重复性略高于Xylazyme AX。
普遍认为,最适合饲料应用的木聚糖酶在 pH 6.0 时具有最佳活性。因此,这些酶通常在 100 mM 磷酸钠缓冲液、pH 6.0 条件下进行测定。然而,在回收率实验中我们发现,磷酸钠缓冲液仅能提取饲料中添加酶量的一小部分(<20%)。因此,研究人员对多种替代提取剂和提取条件进行了评估。对于含有木霉属木聚糖酶的饲料,在室温下使用 100 mM 乙酸或 100 mM 乙酸钠缓冲液(pH 4.7)可获得最佳且最稳定的结果。而腐质霉属木聚糖酶的最佳提取则通过含 100 mM MES 缓冲液(pH 6.0)和 1%(w/v)十二烷基硫酸钠(SDS)的缓冲液实现。
套件:
Neogen提供含有测量动物饲料中木聚糖酶所需试剂的试剂盒。这些套件包含:
瓶1:黑曲霉在50%(v/v)甘油中控制木聚糖酶(瓶上注明在40°C和pH 4.7下的活性)。
瓶2:长臂木霉在50%(v/v)甘油中控制木聚糖酶(在40°C和pH 6.0下测定活性,如瓶上所示)。
瓶3:Xylazyme AX试验片(200片)。
抽汽缓冲器(未附):
(A) 醋酸(0.1 M)
将5.8 mL冰醋酸(1.05 g/mL)加入900 mL蒸馏水中,并将体积调节至1 L。这是缓冲液A。
(B) Tris缓冲液
将20克tris缓冲盐(目录号B-TRIS500)溶解在1升蒸馏水中。将此溶液储存在室温下。这是缓冲区B。
概要:
木聚糖酶(Xylazyme AX)检测试剂盒用于测量酶制剂、面包改良剂混合物和动物饲料中的内切-1,4-β-D-木聚糖酶。含有木聚糖酶AX片剂和木聚糖酶对照品(黑曲霉和长臂木霉)。
规格:每个试剂盒200次检测
运输温度:环境温度
储存温度:短期稳定性:2-8°C,
长期稳定性:见单个组件标签
稳定性:在推荐的储存条件下>2年
分析物:内切-1,4-β-木聚糖酶
检测形式:分光光度计
检测方法:吸光度
波长(nm):590
信号响应:增加
检测限:0.02U/mL测定溶液
再现性(%):~5%
总检测时间:~30分钟
应用实例:动物饲料、酶制剂、面包改良剂混合物和其他材料。
方法识别:广泛应用于饲料行业