β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒
产品简介:
Ø β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(β-galactosidase Assay Kit)是一种用于β-半乳糖苷酶报告基因检测的试剂盒。β-半
乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,经常与荧光素酶报告基因一起转染细胞,被用作荧光素酶报告基因检测的内参照,从而消
除因为质粒的转染效率不同而带来的误差。
Ø 碧云天的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒,是以无色的ONPG为底物,在β-半乳糖苷酶的催化下生成黄色的onitrophenol,
然后通过酶标仪或分光光度计在420nm波长附近测定吸光度,从而实现β-半乳糖苷酶活性的测定。
Ø 如果使用96孔板检测,足够测定200个样品。
相关产品:
荧光素酶报告基因检测试剂盒。
包装清单:
报告基因细胞裂解液 100ml
β-半乳糖苷酶检测试剂 10ml
β-半乳糖苷酶反应终止液 35ml
说明书 1份
保存条件:
报告基因细胞裂解液4℃保存3个月有效,-20℃保存至少一年有效;β-半乳糖苷酶检测试剂-20℃避光保存至少6个月有效,
80℃避光保存至少12个月有效。β-半乳糖苷酶反应终止液可以室温保存,也完全可以4℃或-20℃保存。
注意事项:
Ø 最佳测定波长为420nm,在410-430nm范围测定具有相近的灵敏度。
Ø 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1.
裂解细胞:按如下方式加入报告基因细胞裂解液,充分裂解细胞。细胞裂解后可以立即测定β-半乳糖苷酶,也可以先冻存,待
以后再测定。冻存的样品需融解,并达到室温后才可以开始测定。
器皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
细胞裂解液 (微升/孔) 100 150 200 300 500
2. 融解β-半乳糖苷酶检测试剂,并达到室温。充分融解β-半乳糖苷酶反应终止液,如有难溶结晶,请在37℃水浴溶解。
3. 按仪器操作说明书开启酶标仪或分光光度计,将测定波长设定为420nm。
4. 在96孔板中,分别加入5-50微升样品,然后加入1X报告基因裂解液至最后体积为50微升。
由于不同的细胞体系,不同的转染方法的转染效率相差很大。在第一次测定时推荐取两个样品作预实验。在96孔板中,分别加入
0微升,5微升,10微升,25微升,50微升样品,然后加入1X报告基因裂解液至最后体积为50微升。
5. 在每个孔中加入β-半乳糖苷酶检测试剂50微升,混合后,盖上96孔板的盖子。可以用parafilm或保鲜膜封住96孔板防止蒸发。
在37℃放置30分钟或直至样品孔内出现浅黄色。通常大约3小时后,吸光度达到平台,孵育更长时间吸光度不会明显升高。
6. 加入150微升β-半乳糖苷酶反应终止液终止反应,混匀,尽量避免气泡。
7. 按仪器操作说明书开启酶标仪或分光光度计,将测定波长设定为420nm,测定吸光度。
碧云天由在哈佛大学工作和学习的留学人员创办于2001年。20余年来专注于自主研发和生产。2007年成立上海碧云天生物技术有限公司,为国家级专精特新“小巨人”企业,并进一步入选第二批第一年建议支持的国家级专精特新“小巨人”企业,也是上海市科技小巨人企业、G60科创走廊一类重点扶持企业、上海市高新技术企业和上海市专精特新中小企业。江苏碧云天为江苏省高新技术企业,南通市双创优企。公司主要研发生产生物、医学研究用试剂、试剂盒、消耗品和仪器设备,同时提供生命科学研究的技术服务和一站式实验仪器设备采购平台。公司核心团队由来自美国哈佛大学、NIH、香港大学、中国科学院等国内外著名大学和科研机构的高水平科研人员及诺华、默克等顶尖医药企业的管理人员组成。2016年1人获国务院政府特殊津贴,2人入选“松江区优秀人才”;2019年1人入选国家百千万人才工程,1人入选上海市领军人才,6人获G60科创走廊优秀人才奖励,3人入选长三角G60科创走廊科技精英,3人入选上海市松江区拔尖人才培养计划。2019年碧云天荣获江苏省双创人才创业类第一名,2020年碧云天团队荣获江苏省双创团队创业类最高资助。2020年1人荣获上海市五四青年奖章,多人获G60科创走廊优秀人才奖励。2021年2人次入选国家级领军人才,2022年1人次入选国家级创新人才。截止2022年12月,已有累计超过150000篇注明使用碧云天产品的研究论文发表在包括Cell、Nature、Science等国际高水平学术期刊。Beyotime品牌年度文献引用率国内领先,并跻身全球20强。碧云天将继续致力于科研用技术和产品的研发,用我们最顶尖的技术、最成熟的产品、最热情的服务,服务生命科学,造福人民健康!
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