Lipofecter脂质体转染试剂
产品简介：
Ø Lipofecter脂质体转染试剂(Lipofecter Liposomal Transfection Reagent)是一种适合于把质粒或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸，以及核酸蛋白复合物或带负电荷的蛋白转染到培养的真核细胞中的高效转染试剂。Lipofecter还可以进行活体动物的细胞转染，用于基因治疗等。
Ø 为了实现在真核细胞中高效转染的目的，磷酸钙沉淀法、脂质体、阳离子聚合物、病毒、显微注射、电转等许多方法被发展起来。但这些方法存在一个或多个缺点，包括有细胞毒性、重复性差、操作烦琐、转染效率相对较低或价格非常昂贵等。
Ø 碧云天独立研发的Lipofecter脂质体转染试剂，尽量避免了上述缺点，实现了无明显细胞毒性、重复性好、操作简单、转染效率较高，并且价格非常优惠。
Ø Lipofecter转染试剂是一种经过精心优化配制的阳离子脂质体，Lipofecter不仅适用于常规的质粒转染，也适用于siRNA转染。
Ø 和其它一些阳离子脂质体不同的是，使用Lipofecter转染时血清的存在不影响转染效率，这样可以减小去除血清对细胞的损伤。
Ø Lipofecter对于贴壁细胞和悬浮细胞均适用，并且可以用于稳定表达细胞株的筛选。
Ø Lipofecter的转染效率可以通过转染表达EGFP或其它荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。
Ø 关于碧云天生产的不同细胞转染试剂的主要特点和比较，以及如何选细胞转染试剂可参考我们的相关网页：
http://www.beyotime.com/cell-transfection.htm 。
Ø 对于六孔板而言，一个包装的本转染试剂可以转染100个孔。
包装清单：
产品编号 产品名称 包装
C0516 Lipofecter脂质体转染试剂 0.4ml
— 说明书 1份
保存条件：
4℃保存，一年有效。
注意事项：
Ø 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率。对于质粒，可以使用碧云天生产的质粒大量抽提试剂盒进行抽提，以保证可以获得较高的转染效率。
Ø 转染前细胞必须处于良好的生长状态。
Ø 需自备不含抗生素和glutamine的DMEM溶液。
Ø Lipofecter不能vortex或离心，宜缓慢晃动混匀。
Ø Lipofecter使用后请立即盖好盖子，避免长时间暴露在空气中，影响转染效率。
Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 细胞培养(以六孔板为例，其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作)：
在转染前一天(20-24小时)把约20-60万细胞(具体的细胞数量据细胞大小和细胞生长速度而定)培养到六孔板内，使第二天细胞能达到约70-80%满。
2. 在进行下述转染步骤前，把六孔板每孔内换成新鲜的细胞培养液。
3. 把Lipofecter脂质体转染试剂轻轻混匀。
4. 参考下表，对于待转染的六孔板中一个孔的细胞，依次加入4微升Lipofecter，适量不含抗生素和glutamine的DMEM溶液，及1.5微克DNA，使最终体积为70微升，用枪轻轻吹打混匀。注意：不可Vortex或离心。
One well for 6-well plate
One well for 12-well plate
One well for 24-well plate
60mm dish
Lipofecter
4微升
2微升
1微升
8微升
DMEM
(66-x)微升
(33-x)微升
(17-x)微升
(132-x)微升
DNA
x微升(1.5微克)
x微升(0.8微克)
x微升(0.4微克)
x微升(3微克)
Final volume
70微升
35微升
18微升
140微升
注1：对于六孔板中一个孔的细胞，Lipofecter的用量可以在2-6微升内进行适当调节，DNA用量可以在1-3微克的范围内进行适当调节。最佳的转染条件，因具体的细胞和培养条件而定，可以在上述推荐范围内自行优化转染条件。
注2：对于其它培养板或培养器皿，各种试剂的用量可以按照细胞培养面积按比例进行换算。如果转染RNA或寡核苷酸等可以参考转染DNA的条件进行。
注3：转染siRNA或其它类似的数十个碱基对双链核酸可以参考下表进行：
For siRNA
One well for 6-well plate
DMEM
(67-x)微升
Lipofecter
3微升
DNA
x微升(1微克)
Final volume
70微升
5. 15-25℃孵育15分钟。有可能出现絮状沉淀物，属正常现象，不会影响转染效率。
6. 无论是贴壁细胞还是悬浮细胞，均把70微升Lipofecter-DNA混合物全部加入六孔板的一个孔内。加入时注意尽量均匀加入到整个孔内，随后轻轻混匀。
7. 细胞培养箱内培养5-6小时后，吸除含有Lipofecter-DNA的培养液。每孔加入2ml新鲜细胞培养液继续培养。
注：转染后5-6小时不更换细胞培养液对大多数细胞无明显毒性，更换培养液对一些细胞可以提高转染效率。
8. 对于基因表达，再培养24-40小时后即可检测转染效果；对于RNAi通常需要培养3-5天，并且期间需要更换培养液。如果用于筛选稳定表达细胞株，则在转染后24-40小时即可加入适当的筛选药物，例如G418等，进行稳定表达细胞株的筛选。
碧云天由在哈佛大学工作和学习的留学人员创办于2001年。20余年来专注于自主研发和生产。2007年成立上海碧云天生物技术有限公司，为国家级专精特新“小巨人”企业，并进一步入选第二批第一年建议支持的国家级专精特新“小巨人”企业，也是上海市科技小巨人企业、G60科创走廊一类重点扶持企业、上海市高新技术企业和上海市专精特新中小企业。江苏碧云天为江苏省高新技术企业，南通市双创优企。公司主要研发生产生物、医学研究用试剂、试剂盒、消耗品和仪器设备，同时提供生命科学研究的技术服务和一站式实验仪器设备采购平台。公司核心团队由来自美国哈佛大学、NIH、香港大学、中国科学院等国内外著名大学和科研机构的高水平科研人员及诺华、默克等顶尖医药企业的管理人员组成。2016年1人获国务院政府特殊津贴，2人入选“松江区优秀人才”；2019年1人入选国家百千万人才工程，1人入选上海市领军人才，6人获G60科创走廊优秀人才奖励，3人入选长三角G60科创走廊科技精英，3人入选上海市松江区拔尖人才培养计划。2019年碧云天荣获江苏省双创人才创业类第一名，2020年碧云天团队荣获江苏省双创团队创业类最高资助。2020年1人荣获上海市五四青年奖章，多人获G60科创走廊优秀人才奖励。2021年2人次入选国家级领军人才，2022年1人次入选国家级创新人才。截止2022年12月，已有累计超过150000篇注明使用碧云天产品的研究论文发表在包括Cell、Nature、Science等国际高水平学术期刊。Beyotime品牌年度文献引用率国内领先，并跻身全球20强。碧云天将继续致力于科研用技术和产品的研发，用我们最顶尖的技术、最成熟的产品、最热情的服务，服务生命科学，造福人民健康！
| 单位名称： |
|
详细地址：
上海市松江区新飞路1500弄30号、5号二楼、三楼、68号三楼
|
|
qq：
4001683301
|
|
联系电话：
400-1683301 800-8283301 0513-82105156
|
| Email： |
