特别提示：包括15%预制胶，12孔在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：15%预制胶，12孔
英文名称：Precast Protein Gels, 15%, 12 wells
产品货号：SY0375
产品规格：1盒（10块）

本品通过pH中性缓冲液制备，与甲叉配比是29：1，其规格为浓缩胶5%，分离胶15%，胶板尺寸10×8cm，凝胶厚度1 mm，12孔梳齿，单孔最大上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液，蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad，天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。

N,N-亚甲基双（甲叉）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比，使用预制胶具有以下优点：1）即开即用，不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固，节省了宝贵的时间和精力；2）不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂（/甲叉：神经毒性和遗传毒性；TEMED：强神经毒；过硫酸铵：可严重损伤呼吸道，眼睛，皮肤）；3）大规模生产，胶与胶之间重复性好，质量稳定，不像手工灌胶那样结果差异大。

使用方法

1）剪开包装取出胶，撕去胶板底端胶纸，将预制胶固定在电泳槽中，加入电泳缓冲液没过梳齿部位，双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢（一定要慢，否则会将胶齿拔断或拔歪）拔出，在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡（通过加固前后板，不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙，还可稳定跑胶质量，电泳过程中“V”型卡不可取出），上样后进行电泳，电泳后取出胶板，用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开，将胶取出，弃去塑料板。
2）电泳：使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液（tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%）。推荐使用低压100V，15min换高压150V跑至电泳结束。
3）转膜：使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液（含 20%甲醇或乙醇），操作与实验室原有操作完全相同。

储存条件：4℃，有效期一年。

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本品含有的部分试剂如和甲叉双有毒，对人体有害，请注意适当防护。
3）电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液，试剂纯度不够，反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ，因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4）电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸，否则电路不通，无法电泳。
5）拔梳子时最好浸没在电泳缓冲液中拔，一方面由于液体润滑梳子更容易拔，另一方面不会产生气泡。另外拔梳子时越慢越好，如此可防止梳齿被拔断或拔歪。
6）在电泳后开板取胶时，用小号一字螺丝刀或中号镊子插入左右两板间缝隙，用力搬动，两板即可应声分开，此时两板底部还不能分开，要通过掰开两板取出凝胶。
7）在上样前，使用“V”型卡加固前后板（加样和电泳过程“V”型卡不可移动或拔出），使用时只需将一个“V”型卡“轻轻地”（不必卡到底，不掉即可）卡在前后板的上端中间区域，可确保上样不会产生板胶间的缝隙从而导致样品泄露，电泳时“V”型卡不必取出如此可有助于稳定跑胶质量。
8） 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露，可通过两种方式解决本问题：一是内槽加满缓冲液，外槽液面加至距内槽液面3-5mm，从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装，使其没有凸起的平滑面朝外，从而防止漏液。

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BTN131075 糖蛋白染色试剂盒 10次
SNM402 (粉剂) 500g
SNM480 双标阻断剂 60ml
RFT059 1.5M Tris(pH8.8) 100ml|500ml
KFS055 DyLight405标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒 300T
KFS077 30% Acr-Bis (29:1) 100ml|500ml
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SY0322 预活化正钒酸钠溶液 5ml (200mM)

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名称：细菌膜蛋白质微量提取试剂盒
货号：BTN100929
规格：50次
本试剂盒是基于超速离心的快速提取细菌膜蛋白的试剂盒。其原理是裂解细胞后，通过超速离心分离出细胞膜和附着的蛋白质。

产品特点：
1.一步式分离细胞膜和膜蛋白，密度梯度离心法简单快捷。
2. 膜蛋白纯度高，能够去除各种胞浆蛋白的污染，也能去除松散附着在细胞膜上的蛋白，所得膜蛋白主要是整合蛋白。
3. 膜蛋白完整性好，主要是由于实际中有抑制蛋白酶成分。
4. 回收效率高，一般能得到相当于总蛋白量6%的膜蛋白。
5.可用于E.coli，S.typhimurium，K.aerogens，P.aeruginosa，C.crescentus等细菌。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	125ml
溶液B	25ml
溶液C	250ml
DNase I干粉	3.5mg
说明书	1份

储存条件：低温运输和保存，DNase I 需要低温保存。有效期一年。

使用方法：
准备：第一次使用本试剂盒时需要将所有DNase I干粉倒入溶液B中，轻柔颠倒使DNase干粉溶解。未用完的部分需要放-20℃保存，最好在一个月内完，否则DNase 将逐渐失去活性。此外，最好在实验前1小时将溶液B冰浴预冷。

用法一：小量制备(主要用于上样量比较小的SDS-PAGE电泳等实验)
1．收集20-40mL 过夜培养的细菌饱和培养液(OD420在1.5左右即可)，2500g室温离心10分钟后弃上清。
2．加入2mL溶液A，轻柔吹打，将细菌重悬于溶液A中。
3．2500 g室温离心10分钟后弃上清。
4．加入0.5mL溶液B(必须已经提前加入了DNase I干粉)，轻柔吹打使细菌重悬。注：如果细菌起始量没有20-40mL，溶液A的用量可以等比例降低。重悬在溶液A中的细菌可以放-80℃长期保存。
5．用超声或French Press方法裂解细胞。如果用French Press方法，则需要处理至少两次，每次的压力为9.65×10E7(=14000 psi)。注意：不论用哪种裂解方法，都必须在显微镜下检查细菌是否已经裂解，否则还需要重复细菌裂解过程，直到80%以上的细菌都裂解为止。
6．2500g室温离心8分钟后小心转移上清到新的10mL-15mL塑料离心管中(如Beckman Optima 台式超速离心机离心管)，弃沉淀(未破裂细胞)。
7．在上清(细菌裂解液)中加入5mL预冷的溶液C，轻柔颠倒混匀后冰浴放置30-60分钟。其间可以轻柔颠倒混匀3-5次。
8．用 Bechman Optima 台式超速离心机115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致，否则有可能得不到沉淀。
9．小心移弃上清，在沉淀中加入0.2mL溶液A，充分吹打混匀。
10．用Beckman Optima 台式超速离心机 115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致，否则有可能得不到沉淀。
11．小心移弃上清，所得沉淀放-20℃长期保存，也可以直接加入0.1mL自备的，跟后续实验兼容的缓冲液(如1×SDS-PAGE上样液中，可从本公司购买)，所得膜蛋白的浓度将在1mg/mL左右。

用法二：大量制备(主要用于上样量比较大的2D电泳等实验)
1．收集200-400mL 过夜培养的细菌饱和培养液(OD420在1.5左右即可)，2500 g室温离心10分钟后弃上清。
2．加入20mL溶液A，轻柔吹打，将细菌重悬于溶液A中。
3．2500 g室温离心10分钟后弃上清。
4．加入5mL溶液B(必须已经提前加入了DNase I干粉)，轻柔吹打使细菌重悬。注：如果细菌起始量没有200-400mL，溶液A的用量可以等比例降低。重悬在溶液A中的细菌可以放-80℃长期保存。
5．用超声或French Press方法裂解细胞。如果用French Press方法，则需要处理至少两次，每次的压力为9.65×10E7(=14000 psi)。注意：不论用哪种裂解方法，都必须在显微镜下检查细菌是否已经裂解，否则还需要重复细菌裂解过程，直到80%以上的细菌都裂解为止。
6．2500g室温离心8分钟后小心转移上清到干净的玻璃烧杯中，弃沉淀(未破裂细胞)。
7．在上清(细菌裂解液)中加入50mL预冷的溶液C，轻轻在冰浴中搅拌混匀30-60分钟。注：可以在大烧杯中装冰，然后将装有样品的小烧杯放入，在放入干净的搅拌子，以最低速度搅拌。
8．用 Beckman Type 55.2 Ti转头 115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致。
9．小心移弃上清，在沉淀中加入2mL溶液A，充分吹打混匀。
10．用Beckman Type 55.2 Ti转头 115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致。
11．小心移弃上清，所得沉淀放-20℃长期保存或溶解在1mL自备的，跟后续实验兼容的缓冲液(如1×等电点电泳上样液，可从本公司购买)，所得膜蛋白的浓度在1mg/mL左右。